《天然高分子材料之胶原》课件.ppt

谢谢！ 应用—组织工程 胶原不仅可生物降解，促进细胞生长代谢，还可与其他天然高分子、无机或有机材料以及生物材料复合，这些优点使其在组织工程中优势明显。近年，胶原在组织工程中的应用研究主要有以下几方面。 活性人工皮肤 作为各类组织培养系统的支架。胶原与其它化合物或聚合物复合后，可用于矫形外科或修复骨缺损。目前，一般是利用胶原与羚基磷灰石结合制成复合材料植入人体修复骨缺损。国内外有不少胶原复合物在骨组织工程中应用的报道，表明胶原在骨组织工程中有3种作用:作为支架材料，可为骨细胞的生长提供支架和促进新骨生存;胶原的止血作用;具有覆盖陶瓷或金属植入物的功能。例如透明质酸一胶原复合物系统作为注射骨替代材料，经动物及临床实验证实，复合物比单一或胶原具有更强的骨诱导性 胶原壳聚糖复合膜用于人工角膜 生物矿化（Biomineralization） 生物矿化是指在生物体内形成矿物的过程。与普通水溶液中无机盐的形成不同,生物体内矿物的形成。 是在特殊反应介质、有机基质和细胞的参与下完成的。生物膜所具有的高度有序环境对矿物晶体产生定向诱导,控制其成核、生长和聚集等过程。其矿化机理涉及有机大分子预组织、界面分子识别、生长调控和细胞加工等。 由于生物矿化过程的复杂性, 目前常用脂质体(囊泡) 、胶束、微乳液、自组装膜(SAMs) 、单分子膜和液晶等体系作为模板,模拟有机基质的调控作用和生物大分子的指导作用。 自组装（self-assembly） 所谓自组装，是指基本结构单元(分子，纳米材料，微米或更大尺度的物质）自发形成有序结构的一种技术。在自组装的过程中，基本结构单元在基于非共价键的相互作用下自发的组织或聚集为一个稳定、具有一定规则几何外观的结构。自组装过程并不是大量原子、离子、分子之间弱作用力的简单叠加，而是若干个体之间同时自发的发生关联并集合在一起形成一个紧密而又有序的整体，是一种整体的复杂的协同作用。 纳米－羟基磷灰石/胶原复合材料的制备和表征 自组装的方法制备 nHAC的新思路。这种方法的思路是在胶原分子自组装的同时制备纳米相的羟基磷灰石/胶原复合材料。按照这种方法得到的材料从成分上和结构上都和天然骨有着很大的相似性。相对于传统胶原/羟基磷灰石复合材料来说，由于此材料中羟基磷灰石是纳米相，材料具有更好的生物学性能。 作者对这种材料的理化性能进行了表征，并讨论了动力学因素对nHAC材料制备过程的影响。 制备方法 1. 在酸溶的胶原溶液中缓慢滴加含有PO43-的溶液，PO43-的量为每克胶原0.055mol滴加的同时搅拌，胶原溶液的浓度为0.02g/30ml; 2. 搅拌同时缓慢滴加含Ca2+的水溶液于步骤1制备的溶液中，加入的Ca2+ 量与第1步中加的PO43-的摩尔比为Ca：P=1.66； 3. 搅拌时缓慢滴加NaOH溶液至pH值为6～8，PH值用试纸或pH计测定，在PH值为5～6时开始出现沉淀pH值为7时出现白色悬浊液； 4. 静置溶液1～2天，除去上清，离心分离出沉淀，用去离子水反复清洗三次后，放入冻干机内冰冻干燥，随后研磨制成干粉 样品的分析测定 对得到的nHAC材料进行如下实验： XRD测定晶体结构 热失重分析测定有机成分（胶原等）的含量 SEM结合EDS进行成分分析 红外分析 nHAC切片TEM形貌 Nano-HA crystal 矿化胶原纳米纤维的多级自组装 胶原溶液在4oC下用10 mM HCl稀释成0.6 mg mL-1。CaCl2溶液（1.4 mL 0.1 M）滴加到10 mL胶原溶液中，混合均匀后保持10分钟。NaH2PO4溶液（0.84 mL 0.1 M）滴加到溶液中。溶液的pH用0.1 M NaOH溶液调整到7.0。当溶液的 pH超过6.0时，溶液达到过饱和，磷酸钙开始与胶原沉淀。溶液保持pH 7.0一个小时，沉淀用5000 rpm离心分离得到，然后悬浮在去离子水中以洗去盐。离心和悬浮的循环重复三次，最后样品冷冻干燥后研磨成细粉供实验检测用。 TEM （A）磷钨酸负染的未矿化的自组装的胶原纤维的透射电镜照片显示胶原纤维的直径约为4.0 nm。（B）未染色的矿化的胶原纤维的透射电镜照片显示矿化的胶原纤维的直径约为5.5－6.9 nm。 A B TEM 更大的放大倍数下的矿化的胶原纤维。插入的图是对矿化胶原纤维作选区电子衍射。图中的星号是选区的中心，衍射区域的直径大约是200 nm。 HRTEM 矿化胶原纤维的高分辨透射电镜照片。长箭头指出胶原纤维的长轴方向。两个短箭头指向两个HA纳米晶体。 SEM 矿化胶原纤维的扫描电镜照片 XRD 商业购买的HA （A），矿化胶原纤维（B）和天然骨（C）的XRD比较 FTIR 图3-6 矿化胶原纤维（A），HA沉淀（B）与重构胶原纤维（C）IR比较。 * Co