蛋白质的浓度测定.pptVIP

实验 蛋白质的浓度测定 Folin酚法 实验原理： Folin甲试剂：碳酸钠，氢氧化钠，酒石酸钠，硫酸铜 Folin 乙试剂：磷钼酸-磷钨酸试剂 蛋白质在碱性溶液中与铜形成复合物，然后这种复合物以及蛋白质中的Tyr，Thy残基还原磷钼酸-磷钨酸试剂，发生蓝色反应。蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比。 实验操作：具体步骤参见讲义 实验结果：根据标准曲线判断待测样品的浓度 注意事项： Folin 乙试剂仅在酸性条件下稳定，而还原反应需在碱性条件下发生，所以在加入Folin 乙试剂后需立即摇匀（加一管摇一管），确保还原反应的发生。 紫外线吸收法 实验原理： 蛋白质中的Tyr，Thy残基的苯环含有共轭双键，因此在280nm处有一个紫外吸收高峰。在一定的浓度范围内（0.1~1.0g/L)，蛋白质溶液的A280与其浓度成正比，可用作定量测定。 实验操作：具体步骤参见讲义 实验结果：根据标准曲线判断待测样品的浓度 实验报告要求： 实验原理：请结合自己的理解和讲义的内容用简单的文字描述本次实验的原理 实验操作：请如实记录每次实验中所进行的所有实验步骤 实验结果：请真实的记录和分析每次实验所获的实验数据。 实验分析：对于实验中出现的现象和问题请结合所学的理论知识予以分析。 实验课程要求： 按时达到实验室，事先对将要进