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2.实验中的问题剖析 (1)三个实验为什么不宜选取有颜色的材料? 提示:干扰实验结果的颜色呈现。 (2)实验中,在加相应试剂之前一般要留出部分组织样液,为什么? 提示:作为对照,以便与鉴定后的样液颜色作对比,增强实验的说服力。 (3)鉴定还原糖时,为何将斐林试剂甲液和乙液混合后再滴入待测样液中? 提示:该实验的鉴定原理是利用斐林试剂甲液与乙液混合后生成的氢氧化铜作为弱氧化剂与还原糖发生反应。 (4)脂肪鉴定实验中为什么用50%的酒精洗去浮色,而不用清水? 提示:苏丹Ⅲ(Ⅳ)易溶于有机溶剂,不溶于水。 (5)在使用双缩脲试剂时,为什么要先加入试剂A,后加入试剂B? 提示:先加入试剂A,造成碱性环境,只有在碱性环境中,蛋白质才容易与Cu2+发生颜色反应。 (6)以鸡蛋蛋清液为材料进行蛋白质鉴定实验,发现蛋清液与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管壁上,这是为什么? 提示:鸡蛋蛋清液稀释不够,搅拌不均。 【典例2】 下列是有关检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质实验的叙述,其中正确的是( ) ①斐林试剂的甲液和乙液与双缩脲试剂的成分是相同的 ②双缩脲试剂的甲液与斐林试剂甲液成分是相同的、乙液的成分不相同 ③斐林试剂与双缩脲试剂的使用方法是一样的,都要现用现配 ④还原糖检验中的颜色变化是:浅蓝色→棕色→砖红色,其中的砖红色是Cu2O ⑤制作花生临时装片时,洗去浮色用的是体积分数为50%的酒精 ⑥观察花生临时装片,看到的是一片橘红色,而不是橘黄色的脂肪颗粒 ⑦双缩脲试剂的使用方法是先加甲液后加乙液,加完之后立刻加热出现的颜色是紫色 A.①②⑥⑦ B.②③⑦ C.①⑤⑥ D.①④⑤ 解析:斐林试剂是由甲液(质量浓度为0.1 g·mL-1氢氧化钠溶液)和乙液(质量浓度为0.05 g·mL-1硫酸铜溶液)组成,用于鉴定还原糖,使用时要将甲液和乙液混合均匀后再加入含样品的试管中,且需水浴加热;双缩脲试剂由A液(质量浓度为0.1 g·mL-1氢氧化钠溶液)和B液(质量浓度为0.01 g·mL-1 硫酸铜溶液)组成,用于鉴定蛋白质,使用时要先加A液后再加入B液,无须水浴加热。 答案:D 备选例题 现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和淀粉酶溶液各一瓶,请利用下面提供的资料和材料将它们区分开来。 资料:淀粉酶的化学本质是蛋白质,可以催化淀粉分解为还原糖。 提供材料:带有标签的双缩脲试剂、斐林试剂。 实验方法: (1)先用一种试剂将上述4种溶液区分为两组,这种试剂是 ,其中发生显色反应的一组是 和 溶液,不发生显色反应的一组是 和 溶液。? (2)再用 试剂区分不发生显色反应的一组溶液。水浴加热出现 的是 溶液,另一种是 溶液。? (3)区分发生显色反应一组溶液的方法及鉴定结果是 。? 解析:待鉴定物质可分为三类:还原糖(葡萄糖)、非还原糖(淀粉)和蛋白质(稀蛋清、淀粉酶),因此可首先用双缩脲试剂区分开糖类和蛋白质;进而利用斐林试剂区分开还原糖和非还原糖(淀粉);淀粉可在淀粉酶作用下分解为还原糖,利用这一特性可将淀粉酶和稀蛋清区分开。 答案:(1)双缩脲试剂 稀蛋清 淀粉酶 葡萄糖 淀粉 (2)斐林 砖红色沉淀 葡萄糖 淀粉 (3)将淀粉溶液分别与发生显色反应的两种溶液混合,一段时间后,用斐林试剂分别处理上述两种混合液(水浴加热),无颜色变化的溶液是稀蛋清溶液,出现砖红色沉淀的溶液是淀粉酶溶液 【题组演练】 1.在还原糖、脂肪、蛋白质的检测实验中,最佳的一组实验材料是( ) ①甘蔗的茎 ②油菜籽 ③花生种子 ④梨 ⑤甜菜的块根 ⑥豆浆 ⑦鸡蛋清 A.④②⑥ B.④③⑥ C.①②⑤ D.⑤②⑦ 解析:斐林试剂可用于鉴定还原糖,如葡萄糖、麦芽糖、果糖、乳糖,而不能鉴定非还原糖,如淀粉、蔗糖,梨中富含还原糖,甘蔗的茎和甜菜的块根中富含非还原糖蔗糖。油菜籽和花生种子中富含脂肪,但油菜籽体积小,不适合作为检测脂肪的实验材料。 B 2.下列物质的鉴定与所用试剂、实验手段、实验现象搭配正确的是( ) A.脂肪—苏丹Ⅲ染液—显微镜观察—染成红色 B.葡萄糖—斐林试剂—直接观察—砖红色沉淀 C.蛋白质—双缩脲试剂—直接观察—紫色反应 D.淀粉—碘液—加热观察—蓝色反应 解析:在显微镜下,可以观察到脂肪被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色颗粒;用斐林试剂检测还原糖时,需要水浴加热才能观察到砖红色沉淀;用双缩脲试剂检测蛋白质时不需要加热;淀粉遇碘变蓝,不需要加热。 C 3.根据“检测生物组织中的还原糖、脂肪、蛋白质”实验,回答下列问题。 (1)鉴定梨汁中是否存在还原糖所用的试剂是 ,该试剂与细胞内还原糖发生作用,形成 沉淀,因此,也可用该试剂检验糖尿病病人尿液中 的含量。? (2)鉴定花生子叶中
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