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杜仲组织培养研究 　　摘要：为了筛选出杜仲（Ｅｕｃｏｍｍｉａ ｕｌｍｏｉｄｅｓ）组织培养的最优培养条件，主要从外植体的选择、基本培养基、植物激素、光照条件、其他理化条件等方面对杜仲愈伤组织的诱导、增殖及分化培养的影响进行了综述，分析了杜仲组织培养过程中常见的问题并提出了解决方案，以期为杜仲快繁体系的建立提供理论依据。 　　关键词：杜仲（Ｅｕｃｏｍｍｉａ ｕｌｍｏｉｄｅｓ）；组织培养；诱导；增殖；再分化 　　中图分类号：Ｓ５６７．１＋９ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）02－0228-04 　　 　　Ｒｅｓｅａｒｃｈ oｎ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｅｕｃｏｍｍｉａ uｌｍｏｉｄｅｓ 　　 　　ＹＵＡＮ Ｙｕｎ－xｉａｎｇ 　　（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｗｅｉｎａｎ Ｔｅａｃｈｅｒｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｅｉｎａｎ ７１４０００，Ｓｈａａｎｘｉ， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｓｅｌｅｃｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｕｃｏｍｍｉａ uｌｍｏｉｄｅｓ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ， ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ， ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ conditions for Ｅ. uｌｍｏｉｄｅｓ ｃａｌｌｕｓ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ the aspects of ｃｈｏｉｃｅ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ， ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ， ｐｌａｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅｓ， ｌｉｇｈｔ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ． Ｔｈｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｍｍｏｎ ｐｒｏｂｌｅｍｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｏｆ Ｅ. uｌｍｏｉｄｅｓ Ｏｌｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ． Ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ａ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ｏｎ Ｅ. uｌｍｏｉｄｅｓ ｒａｐｉｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｅｕｃｏｍｍｉａ ｕｌｍｏｉｄｅｓ； ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ； ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ； ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ； ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ 　　杜仲（Ｅｕｃｏｍｍｉａ ｕｌｍｏｉｄｅｓ）系杜仲科杜仲属（Ｅｕｃｏｍｍｉａ）植物，为我国特有的经济树种，是一种名贵的药用植物，特别是对血压有双向调节作用，被认为是世界上高效天然降压药物［１］。杜仲还是一种胶源植物，杜仲胶具有良好的绝缘性、抗酸碱性、热塑性和形状记忆等特点，受到世人的普遍重视［２］。因此，杜仲作为用材、水土保持、绿化的经济树种，集“一林、一胶、两材、三效益”于一体，应用前景广阔［３］。由于杜仲是雌雄异株植物，授粉较为困难，种子产量有限，加之自然环境的破坏和长期无计划的采挖，以及扦插繁殖的技术问题还未得到完全解决，使得杜仲的供应十分困难，生产中种苗的数量缺口很大。组织培养是解决种苗快繁的有效方法之一［４］。 　　杜仲是组织培养较为困难的一种木本植物。目前对杜仲愈伤组织的诱导、增殖方面的研究已有一些报道［５］。本研究在前人工作的基础上，综述了在不同时间采集，以杜仲幼叶、嫩茎及种子无菌苗的下胚轴、子叶、真叶、根为外植体愈伤组织的诱导、增殖、分化及生根的培养基、激素、光照等理化条件，目的在于找出杜仲的愈伤组织诱导、增殖继代、分化及生根的最优培养条件［６］，以期为大规模培养生产杜仲及次生代谢产物奠定基础。 　　１ 外植体的选择 　　高等植物几乎所有的器官和组织都可以作为外植体，在合适的时间，选择适宜的苗龄、合适部位的外植体是有效诱导愈伤组织的关键［６］。同类型的外植体对于诱导产生愈伤组织的难易程度不同，主要是不同的外植体其内源激素是有差别的［７］。杜仲组织培养多采用植株的幼叶、嫩茎及种子无菌苗的下胚轴、子叶、真叶、根为外植体。其中，使用频率最高的为茎尖［８］。 　　１．１ 外植体的种类 　　据罗丽等［７］的报道，杜仲各种外植体的诱导出愈能力比为下胚轴＞子叶＞幼叶，只要培养基中激素配比适宜，杜仲各类外植体均能诱导产生愈伤组织。另据李琰等［９］报道，以杜仲无菌苗作为外植体不仅出愈率高，愈伤组织生长旺盛，且不受季节影响，其中以下胚轴作外植体时，诱导率和生长状况最佳；以幼叶作为外植体时，污染小，便于消毒，出愈率也高；而对于茎，虽然诱导率高，但诱导出的愈伤组织不利于继代，且污染率高，诱导率有下降趋势。此外，邱晓芳等［１０］用杜仲无菌苗不同组织作为外植体，