复方鳖甲软肝片及其联合婴儿双歧杆菌 抗肝纤维化的实验研究-内科学(消化)专业论文.docx

万方数据 万方数据 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者： 日期： 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑 州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者： 日期： 年 月 日 中文摘要 中文摘要 复方鳖甲软肝片及其联合婴儿双歧杆菌抗肝纤维化 的实验研究 博士研究生 郭琦 导 师 郑鹏远 教授 郑州大学第二附属医院消化内科 河南 郑州 450014 中文摘要 目的： 探讨复方鳖甲软肝片及其和婴儿双歧杆菌联用治疗实验性肝纤维化的作用 及其机制。 方法： 采用三种不同的肝纤维化动物模型研究复方鳖甲软肝片及婴儿双歧杆菌治 疗实验性肝纤维化的作用，全文共分四个部分：①复方鳖甲软肝片对四氯化碳 （CCl4）诱导的大鼠化学损伤性肝纤维化的防治作用。采用 CCl4 制备大鼠肝纤 维化模型。将雄性 SD 大鼠随机分为：正常组，模型组，复方鳖甲软肝片 0.6 g/kg、 1.2g/kg 和 2.4g/kg 组，秋水仙碱 0.5mg/kg 组。除正常组外，各组大鼠给予纯 CCl4 溶液皮下注射，之后每 4 天皮下注射 40% CCl4 橄榄油溶液建立肝纤维化动物模 型；正常组腹腔注射等量生理盐水。治疗组在给予 CCl4 同时灌胃给予复方鳖甲 软肝片 0.6 g/kg、1.2g/kg 和 2.4g/kg 组，秋水仙碱 0.5mg/kg；正常组和模型组等 量饮用水灌胃。连续给药 8 周后，测定大鼠肝脏重量（liver weight，LW）、肝 脏质量指数(liver weight index，LWI)、肝功能，血清透明质酸（hyaluronic acid， HA ）和 III 型 前 胶 原 肽 （ precollagen pepride III ， PCIII ） ， 肝 脏 羟 脯 氨 酸 （hydroxyproline，Hyp）含量，病理切片 HE 染色和苦味酸天狼猩红染色观察肝 I 脏组织病变情况和胶原纤维含量，测定肝脏组织血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ， AngⅡ）、抗氧化物和氧化应激产物、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase， MMP）和基质金属蛋白酶抑制因子（tissue inhibitors of metaslloproteinases， TIMP），蛋白免疫印迹法观察药物对肝脏 TGF-β1/smad 信号通路的影响。②复 方鳖甲软肝片对大鼠酒精性肝纤维化的防治作用。建立酒精诱导大鼠肝纤维化 模型。雄性 SD 大鼠随机分为：正常对照组，模型对照组，复方鳖甲软肝片 0.6g/kg 组，复方鳖甲软肝片 1.2g/kg 组，复方鳖甲软肝片 2.4g/kg 组，秋水仙碱 0.5mg/kg 组。除正常对照组给予蒸馏水灌胃外，各组大鼠每天上午给予白酒灌胃，每天 下午各组大鼠给予相应的药物溶液或蒸馏水，给药体积 15ml/kg，连续 10 周后， 测定大鼠肝脏重量，肝脏质量指数、肝功能，血清透明质酸和 III 型前胶原肽， 病理切片 HE 染色观察肝脏组织病理结构，测定肝脏组织抗氧化物、氧化应激产 物和 I/III 型胶（Collagen I/III）原蛋白浓度，RT-PCR 法检测肝脏 CYP2E1mRNA 相对表达量，蛋白免疫印迹法检测肝脏转化生长因子-β1（transforming growth factor, TGF-β1）和 α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）表达量。 ③复方鳖甲软肝片和婴儿双歧杆菌连用联用对刀豆蛋白诱导的小鼠免疫损伤性 肝纤维化的防治作用。用刀豆蛋白诱导免疫性小鼠肝纤维化模型,将雄性 Balb/c 小鼠随机分为 8 组：正常对照组，模型对照组，复方鳖甲软肝片 0.9 g/kg 组，复 方鳖甲软肝片 1.8g/kg 组，复方鳖甲软肝片 3.6g/kg 组，复方鳖甲软肝片 1.8g/kg 和婴儿双歧杆菌 0.5g/kg 联用组，婴儿双歧杆菌 0.5g/kg 组，秋水仙