电刺激对HCN通道特性影响的研究-药物化学专业论文.docx

万方数据 万方数据 学校代号：10524 学 号：2012110470 密 级： 中南民族大学硕士学位论文 电刺激对 HCN 通道特性影响的研究 学位申请人姓名： 瞿祥薇 导师姓名及职称： 李臣鸿 教授 培 养 单 位： 药 学 院 专 业 名 称： 药物化学 论文提交日期： 2015 年 4 月 14 日 论文答辩日期： 2015 年 6 月 1 日 答辩委员会主席： 史岸冰 教授 万方数据 万方数据 Study on characteristics Of HCN channels by electrical stimulation By Qu Xiangwei B.E.(South-Central University for Nationalities)2012 A thesis submitted in partial satisfaction of the Requirements for the degree of Master of Science in Pharmaceutical Chemistry in the Graduate School of South-Central University for Nationalities Supervisor Professor Li Chenhong April,2015 万方数据 万方数据 中南民族大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其 他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个 人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果 由本人承担。 作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查 阅和借阅。本人授权中南民族大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入 有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本 学位论文。 本学位论文属于 1、保密□，在_ 年解密后适用本授权书。 2、不保密√□。 （请在以上相应方框内打“√”） 作者签名： 日期： 年 月 日 导师签名： 日期： 年 月 日 中南民族大学硕士学位论文 中南民族大学硕士学位论文 电刺激对 电刺激对 HCN 通道特性影响的研究 万方数据 万方数据 万方数据 万方数据 摘 要 自从 HCN 通道被发现后，它的超极化激活特性立即引起了科学研究者的重视。 HCN 通道参与了许多神经活动，包括参与调节神经元活动的节律性和树突整合， 调控细胞静息膜电位及突触传递等等。近年来许多研究者将突触上的 NMDA 和 GABAA 受体以及突触外的氨基酸能递质受体作为参与癫痫疾病的发作机制进行研 究，探索 HCN 通道在癫痫疾病中的作用。同时，也有一些研究表明 HCN 通道的 调节异常可能与许多神经系统疾病有关，例如癫痫、神经病理性疼痛、帕金森综 合症等等。 为了研究癫痫疾病中癫痫样放电对 HCN 通道特性的影响，我们通过电刺激实 验，模拟癫痫样放电，从通道蛋白的分布情况、通道特性及分子机制方面进行研 究。研究中，我们利用免疫荧光技术主要研究电刺激对新生鼠海马神经元细胞中 HCN 通道分布情况的影响，利用细胞膜片钳技术研究反复电刺激对 HCN 单通道 开放频率的影响，并利用 ELISA 试剂盒研究电刺激对大脑皮层中 cAMP 含量的影 响。 实验结果显示反复电刺激后 HCN4 通道在神经元细胞胞体和树突上分布情况 发生变化，同时反复电刺激使得 HCN 单通道开放概率的增加。进一步研究发现这 些变化很可能是由于受到 cAMP 的影响所导致的，表现为电刺激后大脑皮层中 cAMP 的含量增加，并且在电刺激后抑制 cAMP 的生成会使得 HCN 单通道的开放 概率降低。 上述结果说明电刺激（模拟癫痫样放电）能够影响神经信号的传导速度，表 现为神经元细胞膜上 HCN 通道的分布情况发生显著性变化，同时可以增加组织中 cAMP 的含量。反复的电刺激还会诱导通道激活，增加 HCN 单通道的开放概率。 在传导速度和通道特性双重机制的影响下，诱导大量神经元参与产生超同步化放 电，而癫痫样放电中这种超同步化现象是癫痫疾病的一种发作机制。我们通过电 刺激实验，模拟癫痫样放电的过程，所得的实验结果不仅能够揭示电刺激对 HCN 通道分布及开放概率的影响，而且有助于解释癫痫疾病中癫痫样放电的发生机制。 关键词：HCN 通道；癫痫样放电；电刺激；环核苷酸腺苷 I ABSTRACT Since HC