稻瘟菌无毒基因单碱基变异及启动子SSR的研究-植物学专业论文.docx

万方数据 万方数据 杭州师范大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得 杭州师范大学 或其他教育机构的 学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名： 签字日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 杭州师范大学 有权保留并向国家有关部门 或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权 杭州师 范大学 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可 以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 （保密的学位论文在解密后适用本授权书） 学位论文作者签名： 导师签名： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 本研究得到浙江省自然科学基金资助 项目（Y3110537）；农业部公益性行业项目 （201203014）的资助 研究工作在浙江省农业科学院“浙江省 植物有害生物防控重点实验室—省部共建 国家重点实验室培育基地”完成 致 致 谢 致 谢 本论文是在导师孙国昌研究员的悉心指导下完成的。三年来，不论在学业方 面还是在生活方面，孙老师都给予了很大的关心和照顾。在此谨向培育我，关心 我的导师表示衷心的感谢和崇高的敬意！ 本论文研究工作是在浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所真菌病害 研究室完成的。在本课题选题及研究过程中，得到姜华老师的悉心指导，姜老师 多次询问研究进程，并为我指点迷津，帮助我开拓研究思路，精心点拨，热忱鼓 励。论文的每个实验细节和数据，都离不开姜老师的细心指导。在此，在此向姜 老师三年来给予的学习上的理解与支持、生活上的关心与帮助致以诚挚的谢意。 值此论文完成之际，感谢浙江省农科院柴荣耀副研究员在实验上给予热情的 支持和帮助。在研究的开展和论文的撰写过程中，本研究组的王艳丽博士、张震 老师、王教瑜老师、邱海萍老师、毛雪琴老师和杜新法老师都给予了热情帮助和 支持，在此表示由衷的感谢。还要感谢杭州师范大学给我提供了很好的学习深造 的机会！ 感谢同实验室的师姐李玲、穆慧敏、张亚楠、王利红、刘毛欣，师兄陈一多 以及同窗好友谢晶晶、周敏，师妹陈海莉、李冬梅、彭艳、张蝶、魏倩、高飞燕 以及师弟顾卓侃、梁刘振等在工作和生活中给予的关心和帮助。与师弟师妹们互 相帮助，愉快相处，其乐融融的情景留下了许多美好的记忆，让我终生难忘。 衷心感谢数十载如一日辛勤培育我的父母和家人，他们一直在我生活和学习 上默默的给予支持和鼓励，使我学业得以顺利完成，本研究的完成离不开他们三 年来默默的付出和无私的爱。 最后谨向所有关心和帮助过我的人表示衷心的感谢！ 余欢 2015 年 3 月 杭州 I 前 前 言 前 言 稻瘟病是世界范围内的真菌病害，给水稻生产带来严重威胁，极大地影响了 水稻的稳产与高产。稻瘟病的致病菌为稻瘟菌（Magnaporthe oryzae），属于子囊 菌亚门真菌。除了侵染植物的地表部位外，稻瘟菌还能从根部侵染植株，引发相 似的症状。稻瘟菌不仅可以侵染水稻，还可以侵染其它禾本科和莎草科植物，如 马唐、牛筋草、狗尾草、稷等。 稻瘟菌侵染寄主时，分生孢子先形成一个专门的侵染结构附着胞，产生巨大 的细胞膨压穿过植物表皮，形成薄的管状初始菌丝，初始菌丝随后膨大形成球根 状的侵染菌丝（IH）。IH 随后在第一次入侵的细胞中扩展，逐渐占据整个细胞， 然后侵入到邻近的细胞中。在侵染过程中，稻瘟菌会分泌一些特殊的激发子，即 无毒基因分泌的蛋白，这类激发子的分泌有两种途径：质外体激发子围绕 IH 在 EIHM 上积累，遵循常规的内质网—高尔基体分泌途径；而细胞质激发子也在 EIHM 中积累并围绕初始菌丝和第一次形成的球根状的 IH 细胞，但不会围绕在 接下来形成的 IH 细胞，这些细胞质激发子遵循非常规的分泌途径，并通过植物 衍生出来的特殊界面结构 BIC 转移到水稻细胞中。 稻瘟菌中的无毒基因与水稻抗性基因符合“基因对基因”的假说，即只有当 稻瘟菌中存在无毒基因，而水稻中同时存在相应的抗性基因时，寄主才会表现出 抗性，引起细胞发生过敏性坏死反应，以阻止稻瘟菌的扩展。并且，大量报道说 明水稻抗病性的持久化与稻瘟菌的无毒基因有着密切关系。因此，对稻瘟菌无毒 基因进行研究，可以促使对稻瘟菌的侵染机制、水稻抗病机制以及水稻-稻瘟菌 之间的协同进化进行进一步的探索和研究，以期能够找到合理的解决方案，最终 实现抗病持久化。 但是，在稻瘟菌的致病系统中，无毒基因是不稳定的，经常会发生变异，变 异机制主要为点突变、插入、缺失等。通过对已克隆的无毒基因