分期及化疗对乳腺癌患者外周血Treg细胞比例的影响及意义-乳腺外科专业论文.docx

广州医学院硕士学位论文乳腺癌患者外周血中 广州医学院硕士学位论文 乳腺癌患者外周血中 Treg 细胞比例变化及其临床意义 PAGE PAGE 2 分期及化疗对乳腺癌患者外周血 Treg 细胞比例的影 响及意义 硕士研究生：余海云 导 师：李文萍 教授 中 文 摘 要 目的 Treg 细胞是 CD4+CD25+T 细胞的亚群，Foxp3 蛋白是其特异性标志。Treg 细胞具 有负性免疫调节作用，促进肿瘤的免疫逃逸，抑制机体的抗肿瘤效应。外周血中 Treg 水平升高，提示肿瘤患者体内免疫抑制程度加重。目前，Treg 细胞已成为 肿瘤免疫治疗的研究热点。本实验通过测定 Treg 细胞比例在不同分期乳腺癌患 者外周血中的变化及化疗对 Treg 细胞比例的影响，了解 Treg 细胞比例变化与乳 腺癌临床病理特征的相关性及化疗对其的影响，以期为乳腺癌提供新的可能的预 后预测因子及判断新辅助化疗疗效的指标。 材料与方法 1.分组：收集 2009 年 3 月-2010 年 12 月期间病例，包括 20 例健康人群（对照 组）、20 例乳腺良性疾病（良性组）及 54 例乳腺癌患者（乳腺癌组），乳腺癌组 包括 0 期（DCIS）7 例，I期9 例，II期 22 例(IIA 11 例，IIB 11 例)，III 期 10 例，IV 期 6 例。 2．治疗方法：良性组均经 MMT 微创手术治疗；DCIS、I、IIA 期患者行保乳/改 良根治术治疗，DCIS 患者不行化疗，I、IIA 期患者 20 例(I 期 9 例，IIA 期 11 例)，行 FEC 或 FEC-T 方案辅助化疗 6 程；IIB、III 期患者 21 例(IIB 11 例，III 10 例)，行 TEC 方案新辅助化疗 3 程后行疗效评估；IV 期乳腺癌患者行 TEC/NP/NX 等方案姑息化疗。 .标本采集：采集所有入选病例治疗前外周静脉血 4ml； I、IIA 期患者术后 1 周（即化疗前 1 天）外周血 4ml,化疗结束后第 10 天外周静脉血 4ml； IIB、III 期患者新辅助化疗后第 10 天外周静脉血 4ml。 .外周血标本处理：新鲜外周血采用 Ficoll 密度梯度离心法分离采集单个核细 胞。 5. 流 式 细 胞 仪 检 测 ： 采 用 鼠 抗 人 单 克 隆 抗 体 抗 CY5-CD4, 抗 PE-CD25, 抗 FITC-FOXP3 标记 Treg 细胞，经流式细胞仪检测，计算获得阳性细胞以（ x ± s ） 百分数表示,Treg 细胞比例以 Treg 细胞/CD4+ T 百分数比例表示。 6.数据分析采用 spss13.0 统计软件，组间比较采用独立样本 T 检验，组内比较 采用配对样本 T 检验，多因素分析采用 linear-regression。 结果 第一部分 不同临床分期乳腺癌患者外周血 Treg 细胞比例的变化及意义 1.1 乳腺癌组外周血中 Treg 细胞比例为（1.34±0.51）%，较良性组（0.81±0.21）% 及对照组（0.75±0.19）%均显著升高，差异有统计学意义（p0.05）；而良性组 Treg 细胞比例与对照组比较无显著性差异（p0.05）。 1.2 各期乳腺癌患者外周血中 Treg 细胞比例均较良性组升高，并随临床分期的 进展呈上升趋势。I～IV 期乳腺癌患者 Treg 细胞比例与良性组相比均有统计学 差异（p0.05），其中 III 期与 IV 期患者 Treg 细胞比例较 I 期与 II 期患者显著 性升高（p0.05），0 期 Treg 细胞比例与 II 期以上乳腺癌相比有显著性差异 （p0.05）。 1.3 乳腺癌患者外周血 Treg 细胞比例与肿瘤病理特征的多重线性相关分析结果 提示：Treg 细胞比例与原发肿瘤大小，组织学分级、淋巴结侵犯情况、Her-2 状 况呈正相关（p0.05），与年龄、ER 受体状况无相关性（p0.05）。对各病理特 征进行分层分析提示：原发肿瘤直径大于 2cm、病理组织学分级 III 级、淋巴结 阳性及 Her-2 阳性时，Treg 细胞比例分别比原发肿瘤直径小于 2cm、病理组织学 分级 I、II 级、淋巴结阴性及 Her-2 阴性时明显升高，差异均有统计学意义 （p0.05）。 第二部分 化疗对乳腺癌患者外周血 Treg 细胞比例变化的影响及意义 2.1 辅助化疗对外周血 Treg 细胞比例的影响：I、IIA 期乳腺癌化疗后外周血 Treg 细胞比例为（0.92±0.32）%，较化疗前（1.13±0.43）%显著下降（p0.05）。 2.2 新辅助化疗对外周血 Treg 细胞比例的影响： IIB 与 III 期乳腺癌新辅助化 疗有效的患者共 17 例，其中 CR