氟尿嘧啶缓释剂对人结直肠癌裸鼠微血管密度的影响及促肿瘤凋亡的机制研究-内科学专业论文.docx

1 1 氟尿嘧啶缓释剂对人结直肠癌裸鼠微血管密度 的影响及促肿瘤凋亡的机制研究 中 文 摘 要 目的： 观察氟尿嘧啶缓释剂植入对人结肠癌裸鼠移植瘤生长及其对大肠癌 中微血管密度（MVD）和生存素（survivin）及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋 白酶-3（caspase-3）基因蛋白表达水平的影响，探讨氟尿嘧啶缓释剂抑制大 肠癌的效果，阐明其在促肿瘤凋亡方面可能存在机制。方法：用人结直肠 癌 LoVo 细胞株建立 BALB/c 裸鼠皮下移植瘤模型，将造模成功的 32 只（总 共 34 只）裸鼠随机分为 4 组：PBS 尾静脉注射组（A 组）、5-FU 尾静脉注 射组（B 组）、5-FU 瘤内注射组（C 组）、氟尿嘧啶缓释剂植入组（D 组）。 分别给予相应的药物干预后，记录瘤体体积、瘤重，并用瘤重计算各组抑 瘤率，比较各组抑瘤效果，瘤体 HE 染色，观察其组织病理改变，并免疫组 化法检测 survivin/caspase-3 以及 CD31(MVD)表达水平。结果：34 只裸鼠有 32 只在 10 d 左右成瘤，成瘤率 94%。各组瘤体体积如下：A 组(3 672±809) mm3、B 组（2 421±466）mm3、C 组 1663±693）mm3、D 组（951±500） mm3，D 与 A、B、C 组比较差异均有统计学意义(P0.05)。瘤重：A 组(2.88 ±0.23) g、B 组（2.31±0.20）g、C 组（1.36±0.26）g、D 组（0.51±0.10） g, D 与 A、B、C 组比较差异均有统计学意义(P0.05)，D 组抑瘤率 82.3% 较之 B(19.8%)、C(52.8%)组明显更高。 HE 染色结果 400 倍镜下： A 组瘤 细胞腺管形成、散在少量凋亡、有片状坏死；B 组肿瘤细胞异型性明显， 恶性程度高，腺管状结构不明显，小区肿瘤细胞有小片凋亡，有小片出血 坏死；C 组肿瘤细胞异型性明显，腺管样结果不明显，小区肿瘤细胞片状 PAGE PAGE 2 凋亡，见出血坏死灶；D 组肿瘤细胞异型性不明显，腺管状结构不明显， 小区肿瘤细胞凋亡明显，仅有少量坏死。100 倍镜下：A 组肿瘤组织侵袭到 脂肪、肌层组织；B 组肿瘤组织有局部侵袭到脂肪组织；C 组肿瘤边界清楚， 未见明显侵袭；D 组肿瘤组织边界清晰，未见侵袭脂肪及肌层组织。各组 survivin 的表达分别是：A(51.50±20.09)%，B(36.63±13.61)%，C(31.63± 11.81)%，D(17.00±8.26)%，其表达是呈现逐渐下降趋势，经统计学分析 D 组跟 A、B、C 组间比较差异具有统计学意义，P0. 05；各组 caspase-3 的 表达如下：A(6.75±1.67)%，B(21.13±3.68)%，C(48.5±6.61 )%，D(72.88 ±.52)%，其表达呈现逐渐上升的趋势，经统计学分析，D 组跟 A、B、C 组间比较差异具有统计学意义，P0. 05；各组通过 CD31 计算的 MVD 值如 下：A(51.88±5.06)%，B(43.13±8.18)%，C(39.50±4.54 )%，D(26.50± 4.53)%，经统计学分析，D 组跟 A、B、C 组间比较差异具有统计学意义， P0. 05。Survivin 及 caspase-3 相关性分析：随着 survivin 表达的降低 caspase-3 呈现升高趋势 (r =－0.653，p =0.000)；Survivin 及 MVD 的相关性 分析：随着 survivin 表达的升高，MVD 呈现升高趋势，经相关性分析得 (r=0.624，p=0.000) 结论： 氟尿嘧啶缓释剂植入对裸鼠结直肠癌移植瘤具有确切的抑制生长效 果，其在促结直肠癌凋亡方面可能存在的机制之一是通过上调 caspase-3 的 表达，下调 survivin 的表达来实现的，其下调 survivin 的表达，可以使肿瘤 的血管生成障碍，干扰肿瘤的血运，从而抑制肿瘤的生长，其对肿瘤细胞 的有效杀伤为临床实践提供了理论指导，其在肿瘤凋亡方面的作用机制， 可为临床大肠癌的治疗提供新靶点、新思路。 关键词： 氟尿嘧啶缓释剂；生存素/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶 -3；微血管密度；结直肠癌；裸鼠 The anti-apoptosis mechanism of sustained-release fluorouracil and the MVD level in nude mice with human colorectal carcinoma ABSTRACT Abstract Objective To observe the MVD and survivin/caspase-3