钙敏感受体在高位脊髓损伤大鼠心肌中的表达-麻醉学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 前 言 高位脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)是指脊髓损伤发生在胸 6 平面以上， 作为临床上常见的极危重症可出现自主神经系统功能严重紊乱，表现为神经源性 休克（不伴有代偿性心动过速的低血压）[1,2]，血流动力学的剧烈波动还会使脊 髓血流量和脊髓动脉灌注压降低，加剧脊髓二次损伤[3] ，甚至发生神经恶化 (neurological deterioration)[4]，进一步加重伤残程度，影响病人生活质量。大多数 手术麻醉医生只重视对心动过缓和低血压的对症处理，但其深层次的原因如心肌 损伤并未得到充分关注，从而直接影响了 SCI 患者围手术期的麻醉安全以及 SCI 患者的早期康复。 钙敏感受体(calcium sensing receptor，CaSR) 是近来发现的诊断心肌缺血 再灌注损伤的新指标，它属 G 蛋白偶联受体超家族 C 家族成员。1993 年首先在 牛甲状旁腺发现[5]，随后证实 CaSR 广泛存在于肾脏、肠道、肝脏、胃、甲状腺、 中枢神经等组织中[6]。CaSR 不仅在维持机体 Ca2+稳态和其它金属离子稳态发挥 关键作用[7]，而且参与调节细胞分化、增殖、凋亡、基因表达、离子通道开放[8,9]。 2003 年 Wang 等证实，在大鼠心肌组织亦存在 CaSR[10]， 同时还在实验中注意 到，CaSR 表达与心肌细胞的损伤程度成正比，提示 CaSR 可能参与心肌缺血/再 灌注损伤。 Ca2＋作为心肌细胞内最重要的信号分子，不但参与生理状态下的心肌兴奋－ 收缩偶联和能量代谢，同时病理状态下 Ca2＋还可影响细胞凋亡。氧化应激是心 肌损伤的常见原因，可使心肌细胞内游离 Ca2＋浓度增高，出现钙超载。一般认 为，钙超载作为心肌缺血再灌注损伤的重要机制，是由于 Na+-Ca2+交换异常、L- 型钙通道的开放和受体介导途径所引起的胞浆内 Ca2+浓度升高[11]。CaSR 激活引 起 Ca2 ＋ 增加的主要机制是内质网 (endoplasmic reticulum ， ER) 或肌浆网 (sarcoplasmic reticulum，SR)中 Ca2＋ 释放。绝大多数情况下，CaSR 的激活通过 c 蛋白介导的第二信使系统(例如，激活 PLC-IP 通路，促使钙库内钙释放；DAG 激活 PKC，通过钙库操纵性钙通道，促使细胞外钙内流)，导致 Ca2＋迅速升高[12] ， 细胞内游离钙增多，引起细胞内钙超载和内质网中钙稳态失衡，从而诱发过度的 内质网应激，导致心肌细胞的凋亡[13]。 钙敏感受体还通过损伤心肌细胞的线粒体来参与凋亡的信号转导通路。张伟 才等研究发现心肌细胞内 Ca2+蓄积是心肌细胞由可逆性损伤变为不可逆损伤的 关键[14]，Ca2+超载可造成线粒体内钙沉积，氧化磷酸化下降至正常的 3%~4%， 能量生成锐减影响线粒体功能，诱发线粒体渗透转换孔(mitochonrial permeability transition pore,mPTP)开放，释放促细胞凋亡的因子，如细胞色素 C，启动细胞凋 亡的进程，引发心肌细胞的凋亡[15]。目前越来越多的专家认为，线粒体是参与 细胞凋亡的重要通路。PTP 的开放，是由于线粒体跨膜电位（?Φm）下降，和 Bax 在线粒体上形成新的孔道和细胞色素 C 的漏出[16]。心肌细胞凋亡的调节基 因主要有 C-Myc、p53 及 Bcl-2 家族。其中 Bcl-2 基因家族是一类结构相似包含 两类功能相反的基因，一类是抑制细胞凋亡的基因如 Bcl-2、Bcl—XL 和 A1 等， 另一类是促进细胞凋亡的基因如 Bax、Bak、Bok、Bc1．Xs 等。Bcl-2 可通过抑 制自由基的产生及细胞内钙超载，抑制线粒体膜的通透性，阻止细胞色素 C 的 释放及抑制线粒体凋亡诱导因子等机制发挥抗心肌细胞缺血再灌注损伤作用。 Bcl-2 高表达时能够抑制大部分脂质过氧化，从而对缺血再灌注心肌具有强大的 保护作用[17]。Bax 的作用正与 Bcl-2 蛋白相反，促进细胞凋亡[18,19]。Bcl-2 和 Bax 两者的比例决定细胞是生存还是凋亡，当 Bcl-2 增多时形成 Bc1-2 同源二聚体， 细胞受到保护；当 Bax 增多时形成 Bax/Bcl-2 异源二聚体，细胞凋亡占优势。由 于 Bc1-2 与 Bax 在线粒体内形成异二聚体，当 Bax 与 Bc1-2 的接合点断裂，则 Bc1-2 对细胞的保护作用消失诱发细胞凋亡[20,21]。 孙智睿实验表明，CaSR 表达增多直接造成细胞内质网膜上的 I R 蛋白表达 增多，最终大量钙离子进入细胞内，引起细胞内钙超载和内质网中钙稳态失衡， 从而诱发过度的内质网应激(endo-pla