钙激活性中电导钾离子通道在宫颈癌中的作用-妇产科专业论文.docxVIP

- - PAGE 10 - 钙激活性中电导钾离子通道在宫颈癌中的作用 中文摘要 研究背景：离子通道广泛分布与各组织器官，在维持机体正常生 理功能及内环境稳态中起积极重要的作用， IKCa1 通道的激活可导致 细胞膜处于长期超极化状态，而促进胞外钙离子内流，从而进一步诱 发复杂的细胞内信号传导，最终引起细胞增殖失控而引起多种疾病的 发生，甚至肿瘤的形成。此外，在人类前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌、 结肠癌、子宫内膜癌等肿瘤组织或细胞中均发现 IKCa1 通道在高表达 [1,2]。尽管当前对宫颈癌的发病机制有了一定的认识，然而，有关 IKCa1 在宫颈癌的发病机制尚不清楚。 目的：本研究通过对宫颈癌HELA细胞株IKCa1离子通道的表达， 及观察阻断IKCa1后对肿瘤细胞增殖周期的影响，探讨IKCa1的表达与 宫颈癌发生的潜在联系及IKCa1参与宫颈癌发生的可能机制。方法： 以宫颈癌HELA细胞株为研究对象，构建包含IKCa1特异性iRNA片段 的pGenesil-IK1质粒。联合运用荧光定量PCR、Western Blotting等分 子生物学方法及膜片钳电生理技术，比较pGenesil-IK1质粒转染或采 用IKCa1通道抑制剂干预前后宫颈癌HELA细胞中IKCa1基因和蛋白表 达水平及IKCa1电流的变化，并观察转染干扰质粒后对HELA细胞增殖 的影响。结果：①宫颈癌细胞的IKCa1电流明显增强，并能被其特异 性阻断剂所抑制。 pGenesil-IK1干扰质粒转染后HELA细胞电流明显 减弱（P＜0.05）；②转染pGenesil-IK1干扰质粒后HELA细胞 IKCa1 mRNA及蛋白表达水平较对照组降低（P＜0.05），③转染pGenesil-IK1 干扰质粒的HELA细胞的生长周期延长；结论：①宫颈癌HELA细胞 上有IKCa1表达，并且是钙离子依赖性的；②与正常宫颈上皮细胞相 比，宫颈癌HELA细胞上IKCa1的表达水平明显升高；③抑制宫颈癌 HeLa 细胞株IKCa1 基因和蛋白的表达，能够有效抑制癌细胞增殖。 关键词 ：宫颈癌；钙激活钾通道； HeLa 细胞株；膜片钳技术； The rolet of Intermediate conductance Ca2+-activated K+ channel in cervical cancer ABSTRACT IN CHINESE Background: ion channels widely distributed with the organization organs, maintaining the normal physiological function and homeostasis in positive important effect, IKCa1 channel activation can lead to cell membrane at long-term super polarization state, and promote the cell calcium ions in the flow, thus further induce complex cell signaling, which causes the cell proliferation and cause a variety of out of control the happening of the disease, even the formation of the tumor. In addition, in the human prostate cancer and pancreatic cancer, breast, colon, endometrial cancer tumor tissues or cells are found in IKCa1 channel in high expression [1, 2]. In spite of the current to the pathogenesis of cervical cancer have a certain understanding of, however, the relevant IKCa1 in cervical cancer pathogenesis is still not clear. Objective: this study of cervical cancer cell lines through HELA IKCa1 ion channels of expression, and observation of the tumor IKCa1 block aft