氟对大鼠心肌细胞的毒性作用及机制研究-生理学专业论文.docx

— — PAGE 1— 摘 要 氟化钠对大鼠心肌细胞的毒性作用及机制研究 研究生 吴起清 导 师 钟近洁 副教授 沈岳良 教 授 摘 要 目的：观察不同剂量的氟化钠对大鼠心肌细胞的毒性作用，探讨氟致心肌细胞 毒性作用的机制。方法：给5组(每组8只)Wistar大鼠饲喂正常饲料，分别饮用含不同 浓度氟化钠(0、25、50、100、150 mg/L)的蒸馏水，复制慢性氟中毒大鼠动物模型。 实验6个月后描记心电图，取大鼠心脏组织进行光镜、透射电镜形态学观察；采用原 位末端标记检测法(TUNEL)测定心肌细胞凋亡指数(AI)，观察各组心肌细胞凋亡情 况；用免疫组织化学法检测大鼠心肌Bcl-2、Bax蛋白的表达，用图像分析技术对检测 结果进行分析。结果：（1）心电图检测结果：氟化钠25 mg/L及50 mg/L组氟中毒大 鼠Q-T间期与对照组比较无差异(p0.05)，氟化钠100 mg/L及150 mg/L组氟中毒大鼠 Q-T间期与对照组比较明显缩短(p0.05)，氟化钠与25 mg/L及50 mg/L组比较则有显 著差异(p0.05)，（2）光镜观察结果：氟化钠100 mg/L组和氟化钠150 mg/L组部分心 肌细胞成凝固性带状坏死；（3）透射电镜观察结果：氟化钠50 mg/L组、100 mg/L 组和150 mg/L组见到线粒体肿胀变形并有结构的改变；（4）心肌细胞凋亡指数：对 照组、氟化钠25 mg/L组未见心肌细胞凋亡；氟化钠50 mg/L组、100 mg/L组和150 mg/L 组心肌细胞凋亡指数显著高于对照组(P0.01)；（5）心肌bcl-2 与bax蛋白表达： 氟 化钠100 mg/L组和150 mg/L组bcl-2蛋白表达显著低于对照组(P0.01)，bax蛋白表达显 著高于对照组(P0.01)，bcl-2/bax显著低于对照组(P0.01)。氟化钠150 mg/L组bcl-2 蛋白表达显著低于氟化钠100 mg/L组(P0.01)，bax蛋白表达显著高于氟化钠100 mg/L 组(P0.01)。与对照组相比，氟化钠25 mg/L组和50 mg/L组bcl-2、bax蛋白表达及 bcl-2/bax 无明显变化(P0.05)。结论: 细胞凋亡机制参与了氟化钠心脏毒性的病理过 程，其作用与下调bcl-2 基因的蛋白表达、上调bax基因的蛋白表达有关。 关键词: 大鼠； 氟中毒；心肌；细胞凋亡 新疆医科大学医学硕士学位论文 Experimental Study on Myocardial Cytotoxicity and Its Mechanism in Rats Exposed to Fluoride Postgraduate: WU Qi-qing Supervisors:ZHONG Jin-jie associate professor SHEN Yue-liang professor Abstract Objective: To detect Its mechanism through experimental study on myocardial cytotoxicity in Male Rats Exposed to Fluoride. Methods: In this study,3-week-old male Wistar rats were fed with distilled water containing sodium fluoride(NaF) of 0、25、50、100、150 mg/L for 6 months respectively in order to duplicate the animal model of drinking water type fluorosis. Electrocardiogram(ECG) was taken after experiment for 6 months to observe the effects of fluoride and ECG of the rats with fluorosis;The morphologic changes under transmission electron microscope were observed. Apoptotic cardiomyocytes were detected using the terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) method ,and the protein expressions of bcl-2、bax in cardiomyocyte