蟾蜍消化道肥大细胞的观察-新.pdfVIP

维普资讯 第 33卷 第4期 河南师范大学学报 (自然科学gt) V0Z．33 No．4 2005卑 11 3ouYnalo HenarlNormalUniversitv (NaturalScience) NOV．2005 文章编号 ：1000—2367(2005)04—0176一O3 蟾蜍消化道肥大细胞的观察 张文学，赵 良真，赵艳红，敢小双 (河南师范大学 生命科学学院，河南 新乡 453007) 摘 要：采用3种不同的固定方法、2种甲苯胺蓝染色方法，对蟾蜍胃和小肠的肥大细胞(mastcells，MC)进行 了研究．结果表明，蟾蜍 胃和小肠中均有 MC分布 ；MC呈长梭形、圆形、卵圆形、不规则形 ，主要存在于粘膜固有层 或粘膜下层内，并且有围绕血管、腺泡分布的趋向；胃的固有层 内MC少于粘膜下层 ，小肠固有层 内MC多于粘膜下 层；胃和小肠肌层中的MC都较少．3种固定方法中，用 Carnoy液 固定效果最好．在快速 甲苯胺蓝染色法中，组织结 构清晰可辨 ，MC易定位 ，呈紫红色 ；在常规 甲苯胺蓝染色法中，MC不易定位 ，被染成蓝色． 关键词 ：蟾蜍；消化道；胃；小肠；肥大细胞 中图分类号 ：Q954 文献标识码：A 自从Ehrlich在大鼠结缔组织中首次发现肥大细胞 (mastcell，MC)以来，人们 已经证实MC分布于鱼 类、家禽类和哺乳动物的多种组织器官中L卜引．MC在不同动物、不同组织器官中存在着形态、分布、颗粒化 学成分、染色特性及超微结构和功能等方面的差异性．查阅现有文献，未见有关两栖类动物MC的报道．两 栖类动物消化道有无MC存在?本文以两栖类动物蟾蜍 胃和小肠为材料，对上述 问题进行初步探讨． 1 材料和方法 采集新乡市郊区蟾蜍 (BufoBufoGargarizans)18只，经枕骨大孔穿刺处死，取其 胃和小肠 ，生理盐水冲 洗 ，分别固定于Carnoy、Bouin和甲醛 3种 固定液中．常规脱水透明，石蜡包埋，切片厚为 6um．取 2只小 鼠 的胃和小肠作为对照．采取以下 2种染色方法： 1．1 快速 甲苯胺蓝 (FTB)染色法 1．1．1 染液配制 将 0．8g甲苯胺蓝完全溶于 8OmL蒸馏水 中；将 0．6gKMnO 完全溶于 2OmL蒸馏水中．将已溶解 的 甲苯胺蓝溶液煮沸 10min．再将 已溶解的KMnO 溶液一滴滴缓缓加入 甲苯胺蓝溶液 中，接着煮沸10min， 使 甲苯胺蓝完全氧化．用蒸馏水补足到 100mL，待 自然冷却后过滤待用． 1．1．2 染色步骤 二 甲苯脱蜡 2次，每次20min；梯度 乙醇脱水；用蒸馏水冲洗2次；滴染液于载玻片材料上染色0．5min， 用流水冲洗 2min；用 9596／的乙醇分色，直至观察到鲜艳含紫红色颗粒的MC；无水酒精脱水 2次，每次 1O min；二甲苯透明2次，每次 10min 中性树胶封片，37℃恒温过夜，制成永久切片；光镜镜检，并计数每个视 野内的MC数． 1．2 常规甲苯胺蓝 N【TB)染色法 取 0．5g甲苯胺蓝溶于 100mL0．5mol／L的 HC1中(pH0．5)；将上述染液滴于载玻片 的材料之上； 37℃孵育 1h；无水乙醇冲洗并脱水 2次，每次 10min；二 甲苯透明2次，每次 10、rain；中性树胶封片；光镜 收稿 日期 ：2005—06—23 基金项 目：河南省教育厅 自然科学基金项 目；河南省动物学重点学科资助项 目 作者简介 ：张文学 (1957一)，男，河南安阳人，河南师范大学副教授 ，主要从事动物学研究． 维普资讯 第4期 张文学等 ：蟾蜍消化道肥大细胞 的观察 镜检，并计数每个视野内的MC数． 2 结 果 小鼠和蟾蜍的胃及小肠壁内均显示出MC(I~ l～9)．MC主要存在于粘膜 固有