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正交试验法优选壮腰膝五味药材组方提取工艺研究 ：龚卫红韩立炜郑海云赵希贤 】目的通过正交试验，优选处方的最佳提取工 艺。方法采用水提取方式，以水为溶剂进行提取，选择加 水倍数，提取时间，提取次数三个因素，每个因素设计三 个水平，因素水平见表1，按照正交实验L9 (34)表进行 试验。分别以总黄酮作为标志性成分，综合考虑，选定最 优提取工艺。结果因素相关性RCRARB,药材的加水量(C) 为主要因素。提取的最佳工艺条件为加8倍量水，提取时 间为h —次。结论优选得到的提取工艺简单、稳定、可行 关键词】正交试验；提取工艺 [Ab stract]Obj ectiveToex periment，t hebestextr actionoptiewaterextrraction, muontimeandnhethreelev actionopti ewaterextr raction, mu ontimeandn hethreelev el, inaccor bleexperim ent. mizationpr actionmeth ltiplechoi umberofthe elsofdesig dancewitht escription od,wateras cewithwate threefacto n，factorle heorthogon ? MethodsTh solventext r,extract! rs, eachoft velsinTabl alL9(34)Ta Resp ectively, a. sasymbolof thecomposi tionoftota Iflavonoid s, consider ingthesele ctedoptima tedtoRORAmainoptimutheamountonclusionTh tedtoRORA mainoptimu theamounto nclusionTh RB, herbsa mextractio fwater, ext eoptimized mountofwat ncondition ractiontim extraction er (C)asthe sfor8times eh, once. Co processiss imple, stab leandfeasi ble. [key words]Orth ogonal; ext raction 骨碎补具有补肾强骨、养伤止痛之功效。用于肾虚腰 痛、耳鸣耳聋、牙齿松动、跌扑闪挫、筋骨伤折等症［1］。 其活性成分为柚皮苷等二氢黄酮类化合物。据报道，用水 提取和醇提取，提取的活性成分含量相差不多［2］。骨碎补 浸膏以水为溶剂时提取效果较好［3］，淫羊藿，具有补肾阳、 强筋骨、祛风湿等功效；黄酮类化合物及淫羊藿苷是淫羊 藿重要的活性成分。可用水提或乙醇提取［4］。怀牛膝，具 有活血祛瘀、补肝肾、强筋骨、利尿通淋、引血下行功效。 甾酮，皂苷，多糖为主要成分。枸杞有清肺、明目、滋肝、 补肾之功效，多糖为主要成分。延胡索具有活血化疲，行 气止痛功效。五味配伍组方则有补肾，壮腰膝，强筋骨止 痛之功效。为了保证制剂质量，用正交设计法研宄其最佳 提取工艺，分析加水倍数，提取时间，提取次数对总黄酮 得率的影响，优选出最佳提取条件。 1仪器和材料 仪器 u V-2800H型紫外可见分光光度计（尤尼柯（上海）仪 器有限公司）。 材料 所有药材均购于北京本草方源药业有限公司。 2方法和结果 样品的制备 按处方投料，加规定量的水，煎煮规定的时间和次数 滤过，滤液浓缩至稠膏，放入真空干燥箱，干燥得干膏作 为样品，进行测定。 正交试验设计 选用L9（3 4）正交试验，结合影响该药材提取效率的主 要因素，考察药材加水量、提取时间、提取次数对总黄酮 含量的影响，同时考虑生产实际，选取3个水平，见表1。 总黄酮含量的测定方法 对照品溶液制备 精密称取芦丁（批号1 00080-XX07，购于中国药品生 物制品鉴定所）mg，加甲醇溶解并定容至100 mL，即得 mg/mL 0 标准曲线的制备 吸取芦丁标准溶液：0、、、、、、mL于1 OmL比色管中， 加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色。求得回归方程 Y=+R 2=,计算试样中总黄酮含量。 供试品溶液的制备 称取一定量的试样（大约g），加乙醇定容至25mL，摇 匀后，超声提取20m in，放置，吸取上清液mL，于蒸发皿 中，加lg聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层 析柱。先用甲苯洗，甲苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮， 定容至25mLo此液于波长360nm测定吸收值。计算试样中 总黄酮含量。 3结果 见表2。 4结果分析 影响因素大小顺序为CA B,即提取为最重要，其次 为含醇量。