井冈山长柄双花木种群遗传多样性与遗传分化cropped.docVIP

井冈山长柄双花木种群遗传多样性与遗传分化_cropped () 第 28 卷 第 3 期 2003 年 6 月 西 南 师 范 大 学 学 报 自然科学版 ( ) Vol . 2 8 No . 3 Journal o f Southwest C hina Normal U niversity Natura lScienc eJ un. 2003 () 文章编号 : 1000 5471 200303 0444 06 井冈山长柄双花木 ? 种群遗传多样性与遗传分化 1 1 1 2 肖宜安,何 平,邓洪平,时明芝 11 西南师范大学 生命科学学院 , 重庆 400715 ; 21 聊城大学 生命科学系 , 山东 聊城 252059 摘要 : 采用不连续系统垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 , 对分布在井冈山的长柄双花木 5 个种群的 5 种同工酶进 行了研究 . 结果表明 : 长柄双花木种群表现出相对较高的遗传多样性水平. 测出的多态位点百分数 P = 62170 % , 平均等位基因数 A = 1163 个 , 平均等位基因数有效数 Ne = 1155. 种群间的遗传距离为 0101,0113 , 其 G= 0109 , st 表明不同种群间的基因分化程度相对较低 . 种群间分化的时间为 4110,65132 万年 , 基因流 N= 2130. m 关 键 词 : 同工酶 ; 遗传多样性 ; 遗传分化 ; 分化时间 ; 长柄双花木 中图分类号 : Q945 文献标识码 : A 1 物种的遗传多样性是长期进化的产物 , 也是其生存和发展的前提. 对稀有和濒危物种遗传多样性和种群遗传结构的研究 , 是揭示其进化历史和适应潜力的基础 , 也是进一步探讨稀有和濒危机制的主要途径之一 , 1 ,2 ( 并且可 为 珍 稀 濒 危 物 种 制 定 科 学 的 保 护 措 施 提 供 重 要 依 据. 长 柄 双 花 木 Disanthus cercidif olius Max2 3 ) im1var1 longipes H1T1Chang属国家重点保护的濒危物种, 分布区局限 , 只分布在江西 、浙江 、湖南等省的部 4 分县, 且植株稀少 , 急需探讨其濒危机制和制定相应的保护措施. 同时 , 双花木属系孑遗的单种属 , 该种原 变种产于日本 , 该变种为中国 —日本植物区系的替代种 , 在探索长柄双花木系统发育和东亚长柄双花木地理 4 ,5 方面该属具有一定的科学意义. 关于长柄双花木的研究 , 目前报道不多. 笔者采用同工酶电泳技术 , 对分 布在井冈山的长柄双花木种群进行研究 , 旨在了解长柄双花木在该地区的遗传变异水平 、种群分化程度 , 为进 一步在整个分布区范围内探讨其群体遗传结构和进化历史以及采取相应的保护措施提供资料. 1 材料和方法 111 样地设置 、取样与制备 () 于 2000 年 9 月底在井冈山长柄双花木全分布范围内 , 根据生境确定 5 个种群 表 1, 随机选取 53 个成 () 年个体上的当年生枝条 5,10 个 均带功能叶 5 片以上 , 不完整或不具有相同发育阶段的植株不采用, 迅 速装入塑料袋 , 编号后放入冰壶内 , 带回实验室放进低温冰箱保存备用. 取叶片洗净 , 用吸水纸吸干 , 称鲜质量 3 g 左右 , 剪碎后置于事先冷却过的研钵中 , 加入少量石英砂和等体积的提取缓冲液 , 在冰浴中迅速研 磨成匀浆 , 经 100 目尼龙纱布过滤 , 取滤液在 TGL - 高速台式离心机上以 16 000 r/ min 离心 20 min , 取上清 液并加入少量 10 %甘油和 1,2 滴 1 %的溴酚蓝指示剂溶液 , 置于冰箱冷冻室保存备用. 提取缓冲液为 : 过 ? 收稿日期 : 2002 10 15 () 基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 () 作者简介 : 肖宜安 1968 - , 男 , 江西永丰人 , 副教授 , 博士研究生 , 现工作单位江西井冈山师范学院生命科学系 , 主要从事植物学 和保护生物学等方面的教学与研究. 通讯作者 : 何 平 , 教授. ( ) () 氧化物酶 PERp H 715 的磷酸缓冲液 ; 苹果酸脱氢酶 MDHTris - HCl 提取缓冲液加 1 %巯基乙醇 、8 % PVP () ) ( ) ( ) (聚乙烯吡咯烷酮和 10 % DMSO 二甲基亚砜; 异柠檬酸酸脱氢酶 IDH、超氧化物歧化酶 SOD和酯酶( ) EST均用 Tris - HCl 提取缓冲液加 011 %巯基乙醇 , 8 % PVP , 5 %蔗糖 , 0104 %的 EDTA 钠盐. () 表 1 各采样地点 种群生境资料