高中生物第1章基因工程1.2基因工程的基本操作程序名师制作优质学案新人教版选修3.docVIP

……………………………………………………………名校名师推荐………………………………………………… PAGE PAGE 1 1．2　基因工程的基本操作程序 1．掌握目的基因获取的常见方法。(难点) 2．学会基因表达载体构建的方法和要求。(重点) 3．理解目的基因导入受体细胞的方法。(重点) 4．掌握目的基因检测与鉴定的具体操作。(重、难点) 　目 的 基 因 的 获 取 1．目的基因 (1)主要是指编码蛋白质的基因。 (2)一些具有调控作用的因子。 2．获取方法 (1)从基因文库中获取 ①基因组文库：含有一种生物所有的基因。 ②部分基因文库：含有一种生物的一部分基因，如cDNA文库。 (2)利用PCR技术扩增目的基因 ①含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 ②原理：DNA双链复制。 ③条件：引物、DNA模板、Taq酶、四种脱氧核苷酸。 ④过程。 a．目的基因DNA受热变性后解链为单链(90～95 ℃)。 b．引物与单链相应互补序列结合(55～60 ℃)。 c．在DNA聚合酶作用下进行延伸(70～75 ℃)。 d．重复循环多次。 ⑤结果：每次循环后目的基因的量增加一倍，即成指数形式扩增(约为2n)。 (3)人工合成法 ①条件：基因比较小，核苷酸序列已知。 ②方法：通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。 eq \a\vs4\al(