Cyt22Ba的大肠埃希菌杀蚊幼活性及增效剂型测试.PDFVIP

·750 · doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2017.06.06 J South Med Univ, 2017, 37(6): 750-754 基础研究 表达蝎毒素表达蝎毒素AaITAaIT 或苏云金杆菌毒素或苏云金杆菌毒素CytCyt22BaBa 的大肠埃希菌杀蚊的大肠埃希菌杀蚊 幼活性及增幼活性及增效剂型测试效剂型测试 邓胜群，邓茗芝，陈嘉婷，郑丽兰，彭鸿娟 南方医科大学公共卫生学院病原生物学系//广东省热带病研究重点实验室，广东 广州 510515 摘要：目的构建表达蝎毒素AaIT 或苏云金杆菌毒素Cyt2Ba 的大肠埃希菌，检测重组菌对致倦库蚊和白纹伊蚊II 龄幼虫的毒 力，并测试不同剂型的增效作用。方法 分别将AaIT 和Cyt2Ba 编码基因克隆于pET28a （+ ）质粒上，并将重组质粒分别转化 BL21 E.coli 获得分别表达AaIT 和Cyt2Ba 的工程菌株，经IPTG 诱导后，用SDS和Western-blot 检测重组蛋白的表达；测 试不同浓度工程菌菌液对于蚊幼虫的杀灭效果；并将有效的工程菌制成干粉剂，检测其干粉末及其配剂对蚊幼虫的杀灭效果。 结果 AaIT 和Cyt2Ba 重组蛋白在大肠埃希菌中成功表达，但AaIT 重组蛋白对蚊幼虫不具有毒性。表达Cyt2Ba 重组蛋白的工 6 7 程菌菌液对白纹伊蚊和致倦库蚊幼虫均具有明显的杀灭作用，48 h 的LC50 分别为3.00×10 和1.25×10 cells/mL ，其中对白纹伊 蚊幼虫的杀灭效果要显著优于对致倦库蚊幼虫的杀灭效果（P0.001），并且表达Cyt2Ba 重组蛋白的工程菌干粉末及其配剂均 具有较好的杀蚊幼虫效果。当该工程菌干粉末与干酵母粉、小麦粉和白胡椒粉分别按4 ∶1、1∶1和1∶4 比例制成配剂处理蚊幼虫 48 h 后，结果显示当质量比为1：1时，配剂杀蚊幼效果显著提高（P=0.044），并且白胡椒粉末配剂效果要显著好于干酵母粉和小 麦粉配剂（P=0.002）。结论 表达Cyt2Ba 的重组大肠埃希菌对蚊幼虫具有较好的杀灭作用，合适配剂的使用可以增强其在蚊虫 防制中的效果。 关键词：AaIT ；Cyt2Ba ；白纹伊蚊；致倦库蚊；苏云金杆菌毒素 Larvicidal activity of recombinant Escherichia coli expressing scorpion neurotoxin AaIT or B.t.i toxin Cyt2Ba against mosquito larvae and formulations for enhancing the effects DENG Shengqun, DENG Mingzhi, CHEN Jiating, ZHENG Lilan, PENG Hongjuan Department of Pathogen Biology/ Guangdong Provincial Key Laboratory of Tropical Disease Research, School of Public Health, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China Abstract: Objective To assess the larvicidal effects of recombinant Escherichia coli expressing scorpion neurotoxin AaIT or Bacillus thuringiensis subsp israelensis (B.t.i) toxin Cyt2Ba against the second instar larvae of Culex pipiensquinquefasciatus and Aedes albopictus and compare different formulations for their larvicidal effects