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实验DNA琼脂糖凝胶电泳
生物科学与工程系生物化学实验教学研究室 大连理工大学 环境与生命学院 实验一 DNA的琼脂糖凝胶电泳 指导老师:苏 乔 副教授 电话606 概 述 1、迁移方向 2、影响迁移率的主要因素: (1)DNA的分子大小 (2)琼脂糖的浓度 (3)DNA的构象 (4)电场强度 3、 未知DNA片段的大小计算线性双链DNA分子,其迁移距离与碱基对数目以10为底的对数值成反比 已知分子大小的DNA标准物(DNA Marker) 可根据电泳样品预计的片段大小选择使用。 4、上样缓冲液(loading buffer)的使用 (1)倍数 (2)上样量少的时候可适当补充缓冲液或ddH2O 5、常用的电泳缓冲液及其组成 技术要点及注意事项 1、使用1×TAE配胶,50mL/2块 2、煮胶要充分,减少蒸发、避免糊底,稍凉即可加入Goldview(5-10μL/100mL) 3、倒胶时要避免产生气泡 4、待胶凝固完全后再拔出梳子 5、电泳槽一定不能短路 生物科学与工程系生物化学实验教学研究室 大连理工大学 环境与生命学院
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