化痰散结法对感染血吸虫小鼠 肝纤维化的干预-中医内科学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要I Abstract III 缩略词表VI 前 言1 论文正文4 第一部分：材料与方法4 1. 实验材料4 2. 实验方法6 第二部分：实验结果15 1. 小鼠一般情况及肝脏组织肉眼观察 15 2. 化痰散结组方对小鼠肝功能的影响 15 3. 小鼠肝组织病理组织学观察 15 4. 化痰散结组方对小鼠肝组织 FNmRNA 表达量的影响 ..17 5. 化痰散结组方对小鼠肝组织 TSPO 表达量的影响 18 讨 论20 1. 肝纤维化“化痰散结”治法的确立 20 2. 浙贝母、漏芦的选方来源及药理作用 20 3. 肝纤维化建模方法的选择 22 4. 血清转氨酶的生化意义 22 5. FN 与肝纤维化 23 6. TSPO 与肝纤维化 25 结 语30 参考文献31 附录38 附录 1. 文献综述 38 附录 2. 各组小鼠肝组织 HE 染色图片 55 万方数据 万方数据 附录 3. 各组小鼠肝组织 TSPO 免疫组化图片 56 致 谢57 万方数据 万方数据 PAGE IV万方数据 PAGE IV 万方数据 中文摘要 目的：探讨化痰散结法对血吸虫肝纤维化模型小鼠肝功能、肝组织中 纤维连接蛋白、18kD 转位蛋白（TSPO）表达的影响，并探究其作用机制， 为中医药从“痰”论治肝纤维化提供试验依据。 方法：采用血吸虫尾蚴感染正常 BALA/c 小鼠建造血吸虫肝纤维化模 型，并制备 50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg 低、中、高三种剂量化痰散结 组方（浙贝母、漏芦乙醇提取物）中药药液，随机将小鼠分为正常组（A 组）、模型组（B 组）、化痰散结组方低剂量组（C 组）、中剂量组（D 组）和高剂量组（E 组）。于第 6 周开始分别对 C、D、E 组小鼠采用化痰 散结组方低、中、高三种剂量中药药液灌胃治疗，A 组和 B 组小鼠采用蒸 馏水灌胃治疗，治疗周期为 8 周。治疗结束,对所有小鼠采取眼球取血方 式留取标本并利用生化分析仪检测血清 ALT、AST 含量，然后采用颈椎脱 臼法处死小鼠留取 3 小块黄豆大小肝组织分别行 HE 染色观察各组小鼠肝 脏病理变化、RT-PCR 法检测纤维连接蛋白 FNmRNA 表达量和 WestBlot 检 测 TSPO 表达量。 结果： 1.于第 6 周取模型组小鼠肝脏组织切片 HE 染色后显微镜下观察发现 小鼠肝组织中虫卵肉芽肿和再生结节形成，汇管区纤维结缔组织增生，炎 症反应明显，证明血吸虫肝纤维化模型建造成功。 2.治疗结束后，模型组小鼠血清 ALT、AST 含量较正常组明显升高， 差异有显著意义（P＜0.01）；而化痰散结组方低、中、高剂量组较模型 组相比，小鼠血清中 ALT、AST 下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；化 痰散结组方低、中、高剂量组三者之间血清 ALT、AST 比较，其差异有统 计学意义（P＜0.05），其中以高剂量组小鼠血清 ALT、AST 降低最为明显， 中剂量组次之。 3.治疗结束后，化痰散结组方低、中、高剂量组与模型组相比，小鼠 肝组织中虫卵肉芽肿平均面积缩小，差异有统计学意义（P＜0.05）；化 I 痰散结组方低、中、高剂量组之间比较，差异有统计学意义（P＜0.05）， 其中以高剂量组虫卵肉芽肿平均面积缩小最为明显，中剂量组次之。 4.治疗结束后，模型组与正常组比较，小鼠肝组织中 FNmRNA 表达量 明显升高，差异有显著意义（P＜0.01）；化痰散结组方低、中、高剂量 组与模型组相比，小鼠肝组织中 FNmRNA 表达量降低，差异有统计学意义 （P＜0.05）；化痰散结组方低、中、高剂量组之间比较，差异有统计学 意义（P＜0.05），其中以高剂量组 FNmRNA 表达量降低最为明显，中剂量 组次之。 5.治疗结束后，模型组与正常组比较，小鼠肝组织中 TSPO 表达量明 显升高，差异有显著意义（P＜0.01）；化痰散结组方低、中、高剂量组 与模型组相比，小鼠肝组织中 TSPO 表达量降低，差异有统计学意义（P ＜0.05）；化痰散结组方高剂量组分别与中、低剂量组比较，小鼠肝组织 中 TSPO 表达量降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；化痰散结组方中、 低剂量组之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论： 1.采用血吸虫感染小鼠一般在 6 周左右能建成血吸虫肝纤维化模型， 且感染尾蚴一般以 15 条左右为宜。 2.化痰散结法治疗血吸虫肝纤维化小鼠有一定的疗效。 3.化痰散结法可能是通过抑制炎性细胞和肝星状细胞 TSPO 的表达和 FN 的分泌达到改善肝脏炎症状态、保护肝功能、阻断纤维化进展的作用。 关键词： 化痰散结法；血吸虫病；纤维连接蛋白；18kD 转位蛋白； 肝纤维化 III万方数据 I