实验三果蝇的双因子实验.docVIP

专业班级：12级生物技术02班姓名：杞正富 实验三 果蝇双子实验 实验三 果蝇双 子实验 一：目的 1：掌握实验果蝇的杂交技术并学习记录交配结果和掌握统计处理方 法 2：通过双因子杂交，验证和加深理解遗传学基本规律 自由 组合规律 3:验证两对非等位基因间的自由组合现象和遗传规律 二：原理 自由组合定律的实质是基因的分离是独立的，而在配子中非等位基 因的自由组合，产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四 种表型，比例为9:3:3:1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状：长 翅与残翅，黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长 翅灰体和残翅黑檀体的双因子杂交实验，旨在验证自由组合定律。黑 檀体果蝇（e）的体色乌黑，与黑色（b）相似，但是它们是不同染色 体上基因所决定的，与（e）相对应的野生型性状是灰体，（e）的座 位是第3条染色体70. 7。残翅果蝇（vg）的双翅几乎没有，只有少 量残痕，与（Vg）相对应的是野生型长翅，（Vg）的座位是第二条染 色体67。交配方式：由于（e）和（vg）是在不同对的染色体上， 两对因子杂种在形成生殖细胞时会产生四种不同的类型，比例为 1:1:1： 1.如H个体相互交配，则通过早i配子相互交配，在子二代 可以得到16种组合，其中9种灰长，3种黑长，3种灰残，1种黑残， 其表现型为9:3:3:1.若用反交，其结果同前面正交相同，但因残翅 果蝇不能飞，只能爬行，所以做雌体比较好，若作雄本，得到的子代 将减少很多。 三：材料与方法 材料：黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）的突变品系， 1方法 3.1.1:配置培养基 根据本实验的需要配制培养基（群体规模越大越好配置培养基的方法 如下（每300ml的配方） A葡萄糖23.5 g 琼脂：2.45 g 蒸馏水：150 ml B玉米粉30.9375 g 水：150ml 加水搅拌均匀后加入 酵母粉：2.625 g 将A和B混合后加热成糊状，加1.875 ml丙酸，即可分装到培养 瓶中 3.1.2：收集雌果蝇的处女蝇 3.1.3：装备好培养基，把已麻醉的的残翅早S果蝇和黑檀体果蝇早 各果蝇，按正反交方式放入不同的培养基内，进行杂交，贴好标签， 标签形式如下 vgvg++早 vgvg++ 早 日期 姓名 早 各 円期 姓名 3.1.4： 6一一7天后，见到有H幼虫出现，可除去亲本（除干净） 3.1.5：再过3—一4天，检查F1成蝇的性状，应该是灰体长翅（正 反交相同）。若性状不符，表明实验有差错，不能再进行下去。发生 差错的原因可能是亲本雌果蝇不是处女蝇，F1幼虫出现后亲本未倒 干净，杂交时雄果蝇选择有误：以及亲本原种不纯等等 3. 1.6：按原来的正反交各选5——6对F1成蝇（孚6 ）,换新的培 养基，继续饲养（此时不需要处女蝇） 3. 1.7:7天后，除去F1代亲本 3.1.8：再过4天，F2代成蝇出现，麻醉以后（可深度麻醉），倒在 白瓷板上，进行统计，每隔两天统计一次，连续统计8天（在F3代 出现前统计完） 四：结果与分析 表1 n代正交统计结果登记表 \ 观察 曰 正交：灰体残翅（￥） x黑檀体长翅（各） 灰体长翅数 灰体残翅数 黑檀体长翅 ■■鼻■丨 1 黑檀体残翅 数 4. 23 7 0 0 0 4. 26 23 0 0 0 4. 28 16 0 0 0 5. 1 29 0 0 0 合计 75 0 0 0 表2 F2代反交结果做x 2测验 灰体长翅数 灰体残翅数 黑檀体长翅 数 黑檀体残翅 数 合计 实际值 （0 ） 219 77 68 15 379 理论值 （C ） 213. 1875 71. 0625 71. 0625 23. 6875 偏差（0 — C ） 5.8175 5. 9375 3. 0625 8. 6875 （0 — C）2 /c 0. 158477 0.496122 0. 131981 3. 186181 f 3 x 2 3.972761 p 0.20 P 0.30 由表2计算结果查卡平方，P〉0.05说明符合两对对基因自由组合 的假说.实验结果与预期结果相符，实验成功。 五：讨论与结论 此实验F1中不要处女蝇这与前人做的相同。此次实验做的一般是黑 腹果蝇的突变品种杂交实验。黑檀体突变型和残翅突变型为亲本一一 这时雌雄果蝇必须是处女蝇。因为n幼虫出现时要把亲本果蝇倒干 净，F1本身就需要自交产生性状分离比为9:3:3:1的F2代。那 么就不要求F1是处女蝇了。 处女蝇选取：与前人做的有所不同。我们将除尽老果蝇有大量卵的培 养基单独存放，待果蝇孵化及羽化，雌果蝇自羽化开始10小时之内 尚未成熟而无交配能力。收集10小时内新羽化出来的新果蝇。麻醉 后在白瓷板上将果蝇雌雄分开，这是得到的雌果蝇应该全部为