课件：细胞染色.pptVIP

细胞染色 基本原理 底物+酶+试剂 显色（多位于细胞内） 过氧化物酶染色(POX) 基本原理 过氧化物酶（血细胞） H2O2 O（新生态氧） 无色联苯胺 蓝色联苯胺 结果 1、胞质中无蓝黑颗粒为阴性 2、细小颗粒，分布稀疏为弱阳性 3、颗粒粗大而密集者为强阳性 过氧化物酶主要存在于粒细胞系和单核系。 细胞 结果 原粒细胞 - 早幼粒细胞 + 中性粒细胞 中幼 ++ 晚幼 ++ 杆状核 ++ 分叶核 ++++ 嗜酸性粒细胞 中幼 ++++ 晚幼 ++++ 杆状核 ++++ 分叶核 ++++ 嗜碱性粒细胞 中幼 - 晚幼 - 杆状核 - 分叶核 - 细胞 结果 红细胞系统 原红细胞 - 早幼红细胞 - 中幼红细胞 - 晚幼红细胞 - 淋巴细胞系统 原淋巴细胞 - 幼淋巴细胞 - 淋巴细胞 - 单核细胞系统 原单核细胞 - 幼单核细胞 -/+ 单核细胞 -/+ 临床意义 1.急性粒细胞白血病时，白血病细胞常呈阳性。急性早幼粒细胞白血病（APL）POX呈强阳性反应。 2.急性单核细胞白血病时，呈弱阳性或阴性。急性淋巴细胞白血病呈阴性反应。 氯乙酸AS.D萘酚酯酶染色（AS.DCE) 基本原理 氯乙酸AS.D萘酚酯酶 氯乙酸AS.D萘酚酯 萘酚AS.D 重氮盐GBC 红色沉淀 结果 有沉淀者为阳性 此酶主要存在于粒细胞系。 细胞 结果 原粒细胞 - 早幼粒细胞 ++++ 中性粒细胞 中幼 +++ 晚幼 ++ 杆状核 + 分叶核 + 嗜酸性粒细胞 中幼 - 晚幼 - 杆状核 - 分叶核 - 嗜碱性粒细胞 中幼 - 晚幼 - 杆状核 - 分叶核 - 细胞 结果 红细胞系统 原红细胞 - 早幼红细胞 - 中幼红细胞 - 晚幼红细胞 - 淋巴细胞系统 原淋巴细胞 - 幼淋巴细胞 - 淋巴细胞 - 单核细胞系统 原单核细胞 - 幼单核细胞 - 单核细胞 - 临床意义 1.急性粒细胞白血病时，白血病性原始粒细胞可出现阳性反应。 2.急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白血病时，白血病细胞均呈阴性反应。 3.急性粒-单核细胞白血病时，部分白血病细胞可呈阳性反应（原粒和早幼粒）。有些白血病细胞呈阴性反应（原始单核和幼单核细胞）。 非特异性酯酶染色 血细胞中所含酯酶各不一致，但皆系作用于短链脂肪酸的酯酶，统称非特异性酯酶。其显示方法是采用偶氮偶联法。由于提供水解的基质不同，血细胞中常见酯酶有以下几种： α-乙酸萘酚酯酶（α-naphthol acetate esterace,α-NAE) 乙酸AS-D萘酚酯酶（naphthol-AS-D-acetate esterase,AS-D-AE） 醋酸AS萘酚酯酶（naphthol-AS-acetate esterase,AS-AE） 氯化醋酸AS-D萘苯分醋酶（naphthol-AS-D-Chloroacetate esterase,AS-D-CE） α-乙酸萘酚酯酶 基本原理 α-乙酸萘酚酯酶 α-乙酸萘酚酯 α-萘酚 重氮染料 有色沉淀 结果 有沉淀者为阳性 此酶主要存在于单核系。 细胞 结果 原粒细胞 - 早幼粒细胞 - 中性粒细胞 中幼 - 晚幼 - 杆状核 - 分叶核 - 嗜酸性粒细胞 中幼 - 晚幼 - 杆状核 - 分叶核 - 嗜碱性粒细胞 中幼 - 晚幼 - 杆状核 - 分叶核 - 细胞 结果 红细胞系统 原红细胞 - 早幼红细胞 - 中幼红细胞 - 晚幼红细胞 - 淋巴细胞系统 原淋巴细胞 - 幼淋巴细胞 - 淋巴细胞 - 单核细胞系统 原单核细胞 ++++ 幼单核细胞 ++++ 单核细胞 ++++ 临床意义 鉴别急性单核细胞白血病。但单核细胞中的酶活性可被氟化钠抑制，故在染色时同时进行氟化钠抑制实验。急性粒细胞白血病时成阴性或弱阳性，但不受氟化钠影响。因此主要用于急性单核细胞白血病与急性粒细胞白血病鉴别。 苏丹黑B染色（SB） 基本原理 脂溶性染料，可溶于细胞质内的含脂物质中，使胞质中的脂类物质显色或深黑色颗粒。 结果 与过氧化物酶实验基本相同. 过氧化物酶主要存在于粒细胞系和单核系。 细胞 结果 原粒细胞 - 早幼粒细胞 + 中性粒细胞 中幼 ++ 晚幼 ++ 杆状核 ++ 分叶核 ++++ 嗜酸性粒细胞 中幼 ++++ 晚幼 ++++ 杆状核 ++++ 分叶核 ++++ 嗜碱性粒细胞 中幼 - 晚幼 - 杆状核 - 分叶核 - 细胞 结果 红细胞系统 原红细胞 - 早幼红细胞 - 中幼红细胞 - 晚幼红细胞 - 淋巴细胞系统 原淋巴细胞 - 幼淋巴细胞 - 淋巴细胞 - 单核细胞系统 原单核细胞 - 幼单核细胞 -/+ 单核细胞 -/+ 临床意义 中性粒细胞碱性磷酸酶染色积分 偶氮偶联法 钙-钴法 碱性磷酸酶 pH9.4～9.6 α－磷酸萘酚钠 α－萘酚 重氮盐 灰黑色