microbe-7+酵母菌的形态观察.pptVIP

* * 实验七 酵母菌的形态观察 及死、活细胞的鉴别 一、目的要求 　　1．观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。 　　2．学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。 二、基本原理 　　酵母菌是多形的、不运动的单细胞微生物，细胞核与细胞质已有明显的分化，菌体比细菌大。美蓝是一种无毒性染料，它的氧化型是蓝色的，而还原型是无色的，用它来对酵母的活细胞进行染色，由于细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型，所以酵母的活细胞无色，而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。 三、器材 　　酿酒酵母或卡尔酵母（Saccharomyces calsbergensis）； 　　0．05％、0．1％吕氏碱性美蓝染液，革兰氏染色用的碘液； 　　显微镜，载玻片，盖玻片等。 四、操作步骤 　　1．美蓝浸片观察 　　(1)在载玻片中央加一滴0．1％吕氏碱性美蓝染液，液滴不可过多或过少。然后按无菌操作法取在麦芽汁琼脂斜面上培养48小时的酿酒酵母少许，放在吕氏碱性美蓝染液中，使菌体与染液均匀混合。 　　(2)用镊子夹盖玻片一块，小心地盖在液滴上。盖片时应注意，不能将盖玻片平放下去，应先将盖玻片的一边与液滴接触，然后将整个盖玻片慢慢放下，这样可以避免产生气泡。　　 　　(3)将制好的水浸片放置3分钟后镜检。先用低倍镜观察，然后换用高倍镜观察酿酒酵母的形态和出芽情况，同时可以根据是否染上颜色来区别死、活细胞。 　　(4)染色半小时后，再观察一下死细胞数是否增加。 　　(5)用0．05％吕氏碱性美蓝染液重复上述的操作。 *