环孢素A预处理对心肌缺血再灌注的作用-生物学；生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

天津医科大学硕士学位论文中文摘要 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的 探讨环孢素A预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用。观察环孢素 A预处理对离体大鼠心脏乳酸脱氢酶活性、心肌梗死面积、心肌细胞的高能磷酸 化合物含量和细胞Na+_K+-ATP酶活性、肌浆网兰尼碱受体钙释放的速度与量以 及肌浆网Ca2+-ATP酶活性的影响。 方法 将72只Wistar大鼠随机分成3组，对照组、缺血再灌注组和环孢素A组， 每组各24只。建立Langendorff离体心脏灌注模型。对照组持续离体心脏逆 行灌注90 min。缺血再灌注组离体心脏逆行灌注使心脏保持持续工作30 min后 转变为缺血30 min，再灌注30 min。CsA组离体心脏逆行灌注平衡10min，用含 有O．1mmol／L环孢素A的K．B液灌注20min后转变为缺血30 min，再灌注30 min。 每组随机选择8只测量灌流液乳酸脱氢酶(LDH)活性以及心肌梗死面积，再 选8只用高效液相法检测心肌组织中高能磷酸化合物，另8只则用超速离心法 提取肌浆网，测量其钙ATP酶(SERCA)和Na+．K+。ATPP酶活性、钙摄取以及 兰尼碱受体(RyR)释放钙。 结果 1．对照组无梗死，且灌流液中LDH活性也较低。环孢素A组与缺血再灌注组 相比，梗死面积降低约31．33％；相应的环孢素A组LDH活性较对照组降低 26．16％；而与对照组相比，梗死面积以及LDH活性均较高俨0．05)。 2．缺血再灌注组高能磷酸化合物较环孢素A组和对照组均低(尸0．05)，且环孢 素A与对照组间有明显统计学差异。 3环孢素A组肌浆网RyR钙释放的初速度和最大量比缺血再灌注组低，而对照 组比缺血再灌注较组和环孢素A组都低(P0．05 4．环孢素A组SERCA和Na+．K+．ATP酶活性与缺血再灌注组相比有显著性差异， 但两者均比对照组低(P0．05)。 结论 1．环孢素A预处理显著降低了缺血再灌注心肌的梗死面积，LDH释放量明显减少， 延缓心肌缺血性损伤，具有心肌保护作用。而钙调神经磷酸酶的活性在CsA组也 比缺血再灌组明显降低，说明CsA作为CaN特异性阻断剂抑制CaN的活性，而梗 天津医科大学硕士学位论文死面积CsA组也比缺血再灌组降低约31．33％，说明CsA可通过抑锘iJCaN信号转导 天津医科大学硕士学位论文 死面积CsA组也比缺血再灌组降低约31．33％，说明CsA可通过抑锘iJCaN信号转导 途径减轻心肌细胞凋亡。 2．环孢素A组Na+，K+．ATP酶活性与缺血再灌注组相比显著降低。’ Na+．K+．ATPase活性的降低能使其对ATP分解成ADP的能力下降，提高心肌高 能磷酸化合物的含量，减少心肌缺血再灌注损伤。 3．环孢素A组肌浆网RyR钙释放的初速度和最大量比缺血再灌注组低，SERCA 活性却有所增高。说明环孢素A可以通过减少心肌缺血再灌注时Ca2+超载来减 少心肌缺血再灌注损伤。 关键词：缺血再灌注环孢素A预处理高能磷酸化合物 ATP酶 钙 释放一tl,肌梗死 天津医科大学硕士学位论文Abstract 天津医科大学硕士学位论文 Abstract Objective To investigate the effect of ciclosporin A on myocardial ischemia．reperfusion and explore the possible mechanism of action．Lactate dehydrogenase(LDH)activity, myocardial infarct size，the amounts of high-energy phosphates and cell Na+-K+-ATPase activities，SR Ca2+-ATPase(SERCA)activities，Ca2+uptake and ca2+ release from ryanodine receptors(RyR)were observed． Methods Seventy-two Wistar rats were randomly divided into three groups：controls(CON， n=24)，ischemia-reperfusion(IR，n=24)and ciclosporin A(CsA，n=24)．Isolated rat hearts were mounted on a Langendorff perfusion apparatus．In CON group，isolated rat hearts were perfused with Krebs-Henseleit(K-H)solution for 90 mi