课件：临床微生物学检验与抗菌药物敏感性试验进展.ppt

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2018-12-14 发布于广东
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课件：临床微生物学检验与抗菌药物敏感性试验进展.ppt

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第三节细菌的耐药性检测六、临床常见的耐药菌株耐甲氧西林的葡萄球菌（MRS）耐青霉素的肺炎链球菌耐万古霉素的肠球菌耐万古霉素的金黄色葡萄球菌产ESBLs的革兰氏阴性杆菌高产AmpC酶的革兰氏阴性杆菌泛耐药的铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌产NDM-1的超级细菌上一页下一页返回第四节侵袭性真菌病的实验诊断一、真菌感染的类型自然界存在的真菌超过一百万种，但仅有400种真菌能导致人类、动物或植物患病。虽然真菌在环境中普遍存在，并且是构成正常人类微生物菌群的一部分，但是由于免疫系统的防御作用，真菌在健康人群中极少导致疾病。根据真菌病的感染部位可以分为以下几类：浅表真菌病皮下真菌病全身性或侵袭性真菌感染上一页下一页返回第四节侵袭性真菌病的实验诊断二、侵袭性真菌感染的危险因素（一）长期应用广谱抗生素。（二）免疫抑制性治疗：免疫抑制剂、糖皮质激素、恶性肿瘤患者、器官移植患者、化疗、放疗。（三）免疫抑制性疾病：中性粒细胞减少、艾滋病。（四）体内留置导管：中心静脉插管、肠外静脉营养、气管插管、放置尿管、机械通气（五）免疫功能低下的患者：糖尿病、新生儿、肾功能衰竭、血液透析、营养不良。上一页下一页返回第四节侵袭性真菌病的实验诊断三、侵袭性真菌感染的流行病学（一）念珠菌感染（二）曲霉菌感染（三）毛霉菌感染（四）隐球菌感染（五）组织胞浆菌感染上一页下一页返回第四节侵袭性真菌病的实验诊断四、侵袭性真菌病临床诊断新进展 IFI的诊断由宿主因素、临床特征、组织病理学和真菌学检查四方面构成，按国外指南分为确诊、临床诊断及拟诊三个层次。其中确诊主要依据组织病理学或血液、胸腔积液等的真菌培养阳性为主要依据。（一）侵袭性真菌病的临床诊断标准 1.确诊IFI：组织学证据。 2.临床诊断IFI：符合1项宿主因素、1项主要临床表现或2项次要临床表现及1项微生物学证据。 3.拟诊IFI：1项宿主因素及1项微生物学标准或2项次要临床标准。上一页下一页返回（二）实验室诊断应用真菌培养：仍然是确诊的金标准。直接镜检：墨汁染色及真菌涂片检查。血清学诊断方法：是应用免疫方法检测血清或其它体液中真菌细胞壁和胞质的成分。由于IFI多继发于严重免疫受损患者，往往缺乏可检测到的抗体，所以检测真菌抗原成为目前实验室诊断的发展方向。 1）GM试验 2）G试验上一页下一页返回 GM试验 GM是曲霉菌细胞壁的成分，最初是从感染动物模型和侵袭性曲霉病患者血清中发现。当曲霉感染时，血液及体液（尿液、脑脊液、腹水、胸水）中会显著增高。在感染早期血清中就能够检测出GM，而且常常早于临床症状和影像学特征出现，研究显示有2/3的患者在其它方法诊断侵袭性曲霉病前6?14天即可检测到GM，连续动态监测（每周2次）对高危患者具有早期诊断价值。 GM试验的Cutoff值为0.5时敏感性增高，有利于早期诊断，但是特异性相对较差，有可能出现假阳性，其原因主要是一些抗原物质与单克隆抗体产生交叉反应所致。例如： 1）哌拉西林/他唑巴坦的应用。 2）胃肠黏膜损伤时谷类食物中的GM抗原通过肠道入血，胃肠外营养时营养液中的某些成分也会与GM产生交叉反应。 3）母乳或配方食品中双歧杆菌与GM有交叉反应，因此儿童和新生儿假阳性高达83%。 4) 一些真菌，如酵母菌、青霉菌、组织胞浆菌也能与GM产生交叉。上一页下一页返回 G试验 1,3 ?-D葡聚糖是酵母和丝状真菌细胞壁的多聚糖成分，原核生物、病毒和人体细胞都不存在这种多聚糖，因此BG作为真菌抗原具有较高的特异性。当真菌进入人体血液或深部组织后，经中性粒细胞及吞噬细胞的处理后，可释放出BG进入血液及其它体液，当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速清除BG。在浅部真菌感染中，BG未被释放出来，故在体液中的量不增高。因此，它在血液及无菌体液中异常增高可以视为的IFI的标志。上一页下一页返回 G试验多项研究表明，BG在IFI临床表现出现之前就已经高于正常值，被认为是早期诊断无创检测手段之一。G实验阳性对诊断真菌感染并无特异性，仍应进行其它确证实验和真菌鉴定。由于某些物质中存在BG类似物，可造成假阳性结果，因此G 试验在用于IFI诊断时必须注意排除假阳性的因素。例如： 1).血液透析使用的纤维滤膜。 2).手术过程中使用的纱布或棉球。 3).真菌为原料制成的抗生素。 4).抗肿瘤药物中蘑菇聚糖、X多聚糖成分。 5).食物中的BG通过受损胃肠黏膜入血。上一页下一页返回