婴幼儿食品和乳品中烟酸和烟酰胺测定.PDFVIP

北京东西分析仪器有限公司 婴幼儿食品和乳品中烟酸和烟酰胺的测定 一、方法提要 烟酸在人体内转化为烟酰胺，烟酰胺是辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的组成部分，参与体 内脂质代谢，组织呼吸的氧化过程和糖类无氧分解的过程。它能促进消化系统的 健康，减轻胃肠障碍；减轻腹泻现象；使皮肤更健康； 使人体能充分地利用食 物来增加能量；它是婴幼儿不可缺少的维生素之一。 本实验根据《食品安全国家标准—婴幼儿食品和乳品中烟酸和烟酰胺的测 定》中提供的方法进行分析测定。试样经热水提取、酸性沉淀蛋白质后，以C18 色谱柱分离，用紫外检测器定量。 二、试剂及标准溶液配制 2.1 2.1 22..11 试剂 淀粉酶：酶活力≥1.5U/mg。 盐酸（分析纯）。 氢氧化钠（分析纯）。 盐酸(2.4mol/L)：准确移取 10mL 盐酸于50 mL 容量瓶中，用水定容。 氢氧化钠溶液（2.5 mol/L）：称取 5.0g 氢氧化钠于 50 mL 容量瓶中，用水 定容。 高氯酸（HClO4）：体积分数为 60%。 甲醇（CH O）：色谱纯。 4 异丙醇(C H O)：色谱纯。 3 8 庚烷磺酸钠(C H NaO S)：优级纯。 7 15 3 2.2 2.2 22..22 标准溶液配制 2.2.1烟酸及烟酰胺标准储备液 （1.0mg/mL）：称取烟酸及烟酰胺标准品各 0.1 g （精确到 0.0001g） ，分别置于 100 mL 容量瓶中，用水溶解定容。 2.2.2烟酸及烟酰胺混合标准中间液（40 µg/mL）：分别准确吸取烟酸及烟酰胺标 准储备液2mL 至 50 mL 定量瓶中，用水定容。临用前配制。 2.2.3 烟酸及烟酰胺混合标准系列测定液：分别准确吸取烟酸及烟酰胺混合标准 中间液1.0 mL、 2.0 mL、 5.0mL、 10.0mL， 至 50 mL 容量瓶中用水定容。 该标准系列浓度分别为 0.80µg/mL、1.60µg/mL、4.00µg/mL、8.00µg/mL。临 北京东西分析仪器有限公司 用前配制。 三、仪器及工作条件 3.1 3.1 33..11 仪器 高效液相色谱仪，带紫外检测器（北东西分析仪器有限公司）。 pH计：精度为 0.01。 超声波振荡器。 天平：感量为 0.1mg。 培养箱：30 ℃～80 ℃。 3.2 3.2 33..22 色谱条件 色谱柱：C18 柱（粒径5 μm，150 mm ×4.6mm）或具有同等性能的色谱 柱。 流动相：甲醇70 mL，异丙醇20 mL，庚烷磺酸钠1 g，用910mL 水溶解并 pH 2.1 0.1 0.45 m 混匀后，用高氯酸调 至 ± ，经 μ 膜过滤。 流速：1.0 mL/min。 检测波长：261nm。 柱温：25 ℃。 20 L 进样量： μ 。 四、分析步骤及分析结果 4.1 4.1 44..11 试样处理 4.1.1 含淀粉的试样：称取混合均匀固体试样约 5.0g（精确到 0.0001g）加入 约 25 mL 45 ℃～50 ℃的水，或称取混合均匀液体试样约 20.0 g（精确到 0.0001g）于 150 mL 锥形瓶中，再加入约 0.5 g 淀粉酶，摇匀后向锥形瓶中 50 6 0 30min 充氮，盖上瓶塞，置于 ℃～ ℃的培养箱内培养约 ，取出冷却至 室温。 4.1.2 不含淀粉的试样：称取混合均匀固体试样约 5.0g（精确到 0.0001g）加 入约25 mL45 ℃～50 ℃的水，或称取混合均匀液体试样约 20.0