Bacillus cereus HDYM02产亚脱胶酶系及其脱胶方式研究.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 分类号 UD C 密级 。 暑哦 ≯产哮 硕士研究生学位论文 Bacillus cereus HDYM．02产亚麻脱胶 酶系及其脱胶方式研究 申请人： 潘超 学 号： 2121225 培养单位： 生命科学学院 学科专业： 微生物学 研究方向： 微生物资源挖掘与利用 指导教师： 葛菁萍教授 赵丹副教授 完成日期： 2015年3月30日 万方数据  要 I嬲幽缈 中文摘要 亚麻脱胶是亚麻可纺纤维制取过程中关键技术环节。生物脱胶是将筛选的脱 胶菌应用于亚麻原茎脱胶，通过脱胶菌分泌果胶酶、半纤维素酶降解胶质成分， 进而提取纯净纤维。与传统的脱胶技术相比，亚麻生物脱胶技术具有缩短沤麻周 期、提高亚麻纤维质量及降低沤麻成本等优越性，具有更广阔的应用前景。 脱胶菌群数量、脱胶酶系的动态变化是生物脱胶进程的重要表征参数。本研 究以分离自温水沤麻液的蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)HDYM一02为供试菌株， 地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)HDYM．03，B．1icheniformis HDYM．04为对 照菌株，开展三个阶段的研究工作： 首先，考察供试菌在牛肉膏蛋白胨培养基(BP)、果胶发酵培养基(PEC)、 魔芋粉发酵培养基(KGM)、纤维素发酵培养基(CMC)产脱胶酶进程及酶系组 分，进而确定供试菌脱胶粗酶液的制备条件。结果表明，B．cereus HDYM．02在PEC 培养基、KGM培养基中均产果胶酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶，在PEC培养基中发 酵48 h、KGM培养基中发酵72 h后，果胶酶最高活力分别为1115．1士28．7 U／mL 和666．7士8．6 U／mL，显著高于对照菌(P0．05)。B．cereus HDYM．02在PEC和KGM 培养基中发酵48 h后，甘露聚糖酶最高活力分别为198．3士1．4 U／mL和3010．5士31．4 U／mL，显著高于对照菌(尸O．05)。B．cereus HDYM．02在CMC培养基中产纤维 素酶活力低。因此确定B．cereus I-IDYM．02为后续研究的脱胶菌株。 然后，在PEC和KGM培养基中制各粗酶液P和粗酶液K。粗酶液P与粗酶 液K中果胶酶和甘露聚糖酶性质研究结果表明，在pH值为5．0—6．0，温度为 35℃-40。C条件下，果胶酶和甘露聚糖酶稳定性较好。 最后，以B．cereusHDYM一02为脱胶菌，构建自然脱胶(CK)、加菌脱胶(BA)、 加粗酶脱胶、加商品酶脱胶四个温水沤麻系统，并探索供试菌在亚麻脱胶实践中 最佳应用方式。BA与CK对比分析表明，BA 72 h果胶酶活力、甘露聚糖酶活力 和木聚糖酶活力分别为200．1士4．9 U／mL、169．4士3．0 U／mL和139．4士4．0 U／mL，显著 高于CK。电镜结果显示，BA纤维表面光滑胶质去除明显。BA脱胶周期比CK缩 万方数据  黑龙江大掌硕士学位论文 短24 h。BA与粗酶液脱胶的对比分析表明，粗酶液P脱胶组与粗酶液K脱胶组在 60 h果胶酶活力最高分别可达731．0-a=9．2 U／mL和490．1+19．4 U／mL，显著高于BA。 粗酶液K脱胶组60 h甘露聚糖酶活力最高可达2388．6士51．2 U／mL，显著高于其它 脱胶组。亚麻纤维电镜结果显示，粗酶液P组亚麻脱胶效果明显优于其他脱胶组。 粗酶液P脱胶组与BA组相比脱胶时间缩短12 h。 ‘ B．cereus HDYM一02在PEC、KGM产果胶酶活力和产甘露聚糖酶活力显著高 于对照菌。通过粗酶液P方式进行脱胶，缩短了沤麻周期，亚麻纤维形态最佳。 本研究中，B．cereus HDY-02产脱胶酶进程时间短、脱胶酶系丰富，且供试菌 产脱胶酶作用条件温和、酶活稳定性好，利用该粗酶液脱胶获得了理想的效果， 显示出在亚麻生物脱胶应用中潜力巨大。本课题为生物脱胶技术的推广提供了重 要支撑，同时为B．cereusHDY-02在亚麻生物脱胶中的进一步应用提供了理论依据。 关键词：蜡状芽孢杆菌；亚麻；生物脱胶；脱胶酶 H 万方数据  Abstract Abstract Flax degumming is the key link in the process of flax textile fiber production． Biological degummihg aim to screening of degumming bacteria using in flax stem degumming．Pure fiber can be extracted via enzyme．component such as pectinase an