As2O3对人胰腺癌细胞p16 cyc基因表达变化的影响.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 广东医学院 硕士学位论文 As2O3对人胰腺癌细胞p16、c-myc基因表达变化的影响 姓名：邱志东 申请学位级别：硕士 专业：@ 指导教师：缪辉来 200901 As203对人胰腺癌细胞 As203对人胰腺癌细胞p16、c—myc基因表达变化的影响 中文摘要 目的 胰腺癌(pancfeatic c舭cer)是一种较常见的恶性肿瘤，在我国的发病率呈 逐年上升的趋势，其发病率高，生长快。目前仍以手术为主要治疗手段，但手 术治愈率低，90％的病人在诊断后一年内死亡，5年生存率仅l％～3％。因此， 寻找一种有效的治疗药物对于胰腺癌患者来说具有重要意义。As203是传统中 药砒霜的有效成分，作为抗肿瘤药用于治疗白血病获得成功以来，人们将As203 用于实体肿瘤，并取得显著疗效：人类肿瘤的发生、发展与组织细胞内基因的 变化有密切的关系，癌基因的激活和抑癌基因的失活，以及它们之间的协同或 拮抗作用在细胞分裂生长、转化过程中发挥重要作用；目前认为As203抗肿瘤 的机制与诱导细胞凋亡和分化有关，但As203诱导胰腺癌细胞中基因表达或失 活的研究较少。 本研究以人胰腺癌Ⅳ州C．1细胞作为研究对象，采用不同终浓度的As203 处理人胰腺癌Ⅳ烈C．1细胞，观察其对胰腺癌细胞增殖的影响；比较As203作 用48小时前后抑癌基因p16和原癌基因c-myc表达的变化，从分子水平探讨 As203对胰腺癌的作用机制，为胰腺癌新的治疗方案提供理论依据。 方法 MTT法检测As203对入胰腺癌PANC．1细胞增殖的影响。处理组用终浓 度为2pmol／L、1呻lol／L、0．5pmol／L的As203加入人胰腺癌PANC．1细胞中，空 白对照组不加药物，作用48h后，采用反转录PCR(1mPcR)检测人胰腺癌 PANC-1细胞中抑癌基因p16和原癌基因c．myc在As203处理前后lllI矾A水平 的表达情况，采用免疫印迹(westenl blot)方法检测As203处理前后抑癌基因 p16和原癌基因c-myc蛋白水平的表达情况。用QIl枷哆One软件测量目的条 带灰度积值与内参条带灰度积值的比，进行半定量分析。 ●主甲 ●主甲 ；日爿号 (1)As203对人胰腺癌PANC．1细胞生长增殖的影响 在浓度为0．5“moⅥ。时，随着作用时间的延长，细胞抑制率之间的差异无 统计学意义(Po．05)，而在1．O}Lmol／L一2．0岫ol／L浓度时，随着作用时间的延 长，细胞抑制率逐渐增加(P_o．05)；在作用时间相同时，随着药物浓度从 O．5pmol／L到2．0“mol／L增加，抑制率也逐渐增加(pO．05)。As203在一定浓度 范围内对细胞增殖的抑制作用具有时间和剂量效应。 (2)As203对人胰腺癌PANc．1细胞中p16、c-myc删RNA的影响 半定量ImPCR分析人胰腺癌PANC．1中目的基因p16和c．myc mRNA表 达，结果表明As203处理人胰腺癌PANC．1细胞48h后，随着舡203作用浓度 的增加，抑癌基因p16 111]刚A表达逐渐增强，而原癌基因蛳yc mI矾A表达逐 渐减弱。空白对照组和不同浓度舢1203作用人胰腺癌PA．NC．1细胞的处理组之 间差异均有统计学意义(尸≮O．05)，不同浓度As203作用人胰腺癌ⅣmC．1细胞的 处理组之间差异均有统计学意义(尸≮0．05)。 (3)As203对人胰腺癌PANC．1细胞中P16、c-myc蛋白水平的影响 WeSt锄B10t分析人胰腺癌鼢NC．1细胞中目的基因P16、c-nlyc蛋白水平 表达，结果表明As203处理人胰腺癌黝蝌C．1细胞48h后，随着AS203作用浓 度的增加，P16蛋白表达是逐渐增强的，而争myc蛋白表达逐渐减弱。空白对 照组和不同浓度AS203作用人胰腺癌PANC．1细胞的处理组之间差异均有统计 学意义CPO．05)，不同浓度As203作用人胰腺癌PANC．1细胞的处理组之间差异 均有统计学意义(PO．05)。 结论 As203可诱导人胰腺癌P：ANC—l细胞中p16基因表达增强，同时可诱导原癌 基因c蚰yc表达减弱，并以此抑制胰腺癌细胞的增殖，从而抑制肿瘤生长。 关键词胰腺癌；As203；p16；c-myc； 2 EfIfect EfIfect on the change of the expression of the p16 and c—nlyc gene by arsenic trioxide in pancreatic cancer ceU Abstract objectiVe： Pancreatic caIlcer is a c0IIl】【non mali孕mlt tIⅡnor，me incid阻ce rate is舔