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Cdc42对小鼠釉质发育影响的初步研究-口腔医学专业业论文
硕士学位论文本论文分以下四个部分内容:
硕士学位论文
本论文分以下四个部分内容: 第一章:Cdc42在小鼠牙胚发育中的表达
本实验分别获取E13.5、E15.5、E17.5及E19.5的小鼠磨牙牙胚,经过固 定、脱水、透明、包埋蜡块,最后得到组织切片。将组织切片进行HE染色和组 织免疫荧光检测。通过免疫荧光方法检测整个牙胚发育包括蕾状期、帽状期、 钟状期、钟状晚期等过程中Cdc42的表达情况,初步了解其在牙胚发育尤其釉 质发育过程中都有不同程度的表达。
第二章:小鼠成釉细胞离体培养、纯化及鉴定 本实验通过酶消化法体外培养小鼠成釉细胞,缩短培养时间。以基底膜抽
提物包被,利于细胞贴壁及生长。并通过差速消化法,可获得纯化的成釉细 胞。其纯度较高,有利于相关基础研究的进行,为小鼠成釉细胞的体外培养及 纯化提供了思路。
第三章:Cdc42在小鼠成釉细胞中的表达 本实验通过RT.PCR从mRNA水平证实了小鼠成釉细胞中Cdc42的存在,
用Westernblot从蛋白水平检测了Cdc42在小鼠成釉细胞中的表达,最后通过免 疫荧光进一步明确定位Cdc42主要表达于小鼠成釉细胞胞膜与胞质位置,为以 后探讨Cdc42在小鼠成釉细胞中所发挥生物学功能影响奠定了基础。 第四章:抑制Cdc42对小鼠成釉细胞釉基质蛋白表达的影响
本实验通过运用Cdc42抑制剂MLl41培养小鼠成釉细胞,达到抑制细胞中 C
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