高胆红素血症与神经细胞凋亡关系的实验研究-儿科学专业论文.docxVIP

高胆红素血症与神经细胞凋亡关系的实验研究 摘 要 且的探讨高胆红素血症新生鼠海马区Fas蛋白、N一甲基-1)-天冬氨 酸(NMDA)受体的表达、神经细胞凋亡率及其间相关性，以进一步阐明胆 红素的神经霉性机制。方法将实验动物(出生l周的SD大鼠)随机分 成对照组(CG)、实验l组(T。G)及实验2组(T：G)。向后两组动物腹腔内 分别按0．i71“mol／s体重(10011 9／9体重)和0．342 u mol／9体重 (200 u 9／9体重)的量注射胆红素溶液，以建立高胆红素血症动物模型。 对照组动物以生理盐水取代胆红素溶液作腹腔注射。采用免疫组化法、 TUNEL法及流式细腔术检测太鼠海马区Fas蛋自、NKOA受体的表达程度及 神经细胞凋亡率，并探讨其间的相关性。结果(1)T,G、T。G的血清及脑 组织胆红素浓度非常明显地高于CO；T2G明显高于T,G，差异有极显著性 (PO．001)。(2)在光镜下T，G及T2G均可见黄色的胆红素沉积。(3)在 光镜、电镜下观察神经细胞及其超徽结构的改变，发现T，G神经细胞肿胀， 线粒体肿胀，嵴减少，染色质边集、浓缩，有髓鞘样蜕变物形成。T：G可见 部分神经细胞呈嗜酸性交，细胞核染色质浓缩、边集，有核孔出现，髓鞘 样蜕变物形成增多，基本符合细胞凋亡的组织学改变。(4，通过免疫组化 染色，发现NMDA受体主要在海马区神经元中表达，而Fas蛋白则在神经元 及胶质细胞中均有表达，TlG和T。G明显地高于CG，表达程度T2G又明显地 高于T。G，差异均有显著性(P0．01)，且与神经细胞凋亡率、脑组织胆红素 浓度呈正相关(rO．6，PO．05)。(5)经TUNEL法及流式细胞术检测发现， T．G．T。G较CG的凋亡陌性细胞率及凋亡率增高，差异有显著性(P0．01)。 结论：高胆红素血症时，胆红素通过NI蝴DA受体过度活化和Fas系统的参 与，传递凋亡信号，介导胆红素神经毒性的发生，导致神经细胞凋亡。 关键词：高胆红素血症： Fas蛋白： NMDA受体； 凋亡：大鼠 II  An experimental study on the relalionship ofhyperbilirubinemia and neuroncyte apoptosis Abstract 0bjective To explore the expression of Fas pretein，N—methyl一D— aspartate(NMDA)receptor,the rate of neuronal apoptosis in the hippocampus under the hyperbilirubinemia and elucidate the molecular mechanism of bitirubin neurotoxicity．Methods The anminals were radominzed抽to 3 groups：control group(CG)，test-1 group(T1G)and test一2 group(T2G)． Bilimbin were injected into 7-day old Sprague—Dawley rats’abdominal cavity tO set up the hyperbilirubinemia model．Oberving their neuronal behaviours and the pathological changes，investgating the bilirubin content inplasma and brain．The expression of Fas protein，NMDA receptors，the rate of neuronal apoptosis were investigated with immunohistochemical methods and flow cytometry in the hippocampus and the correlations among them were explored．Results(1)The neurons and mitochondria swollen． mitochondria spines reduced in TIG，neurons had acidophile degeneration， chronmate in nuclcouses concentrated nucleus pores appeared in T2G． These changes accorded with．-patholo垂cal changes