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PEG-EPO中游离PEG的示差折光率检测 　　基金项目:国家重大新药创制 (No. 2012ZX09202 - 031 - 004 ) 　　作者简介:庞甲佩, 男, 工程师, 研究方向:生物制药, E - mail :pangjiapei@ 163. com PEG - EPO 中游离 PEG 的示差折光率检测 　　庞甲佩 1 , 2 , 解福生 1 , 2 　　, 胥国立 1 , 赵婷婷 1 , 马立平 1 　　(1. 山东阿华生物药业有限公司, 山东 东阿 252201 ; 2. 山东东阿阿胶股份有限公司, 山东 东阿 252201 ) 摘要:目的 　 建立完善折光率检测 PEG - EPO 中游离 PEG 。 方法 　 色谱柱为 Tosohaas TSK SP - 5PW (7. 5 mm × 75 mm , 10 μm ) 和 TSK G3000 SWxl (7. 8 mm × 300 mm , 5 μm ) , 流动相为 0. 01 mol ·L - 1 柠檬酸, pH 3. 0 , 流速 1 mL 　　·min - 1 , 柱温 35 ℃ , 应用 Waters 2414 示差折光率检测器检测。 结果 　 游离 PEG 溶液在 5. 0 ~ 80 μg ·mL - 1 范围 　　内有良好的线性关系, r = 1 ; 重复性试验峰面积的 RSD 值为 0. 46% , 主峰保留时间的 RSD 值为 0. 23% ; 平均回收率 　　为 101. 6% (n = 9 , RSD 为 1. 92% ) 。 结论 　 　　该方法操作简便, 快速准确, 可以很好地用于 PEG - EPO 中游离 PEG 　　的检测, 经过适当调整, 同样可用于其它其他 PEG 化蛋白药物中游离 PEG 的检测。 　　关键词:高效液相色谱法; PEG - EPO ; 游离 PEG ; 示差折光率检测器 　　中图分类号:R927. 1　 文献标识码:A　 文章编号:2095 - 5375 (2013 ) 11 - 0646 - 003 　　A differential refractive index detecting method of free PEG in PEG - EPO 　　PANG Jia?pei 1 , 2 , XIE Fu?sheng 1 , 2 　　, XU Guo?li 1 , ZHAO Ting?ting 1 , MA Li?ping 1 　　(1. Shandong E?hua Biopharmacy Co. , Ltd. , Donge 252201 , China ; 2. Shandong 　　Dong?e E?jiao Co. , 　　Ltd. , Donge 252201 , China ) Abstract :Objective 　 　　To establish a differential refractive index detecting method of free PEG in PEG - 　　EPO. Methods　 The Tosohaas TSK SP - 5PW 　　(7. 5 mm × 75 mm , 10 μm ) and TSK G3000 SWxl (7. 8 mm × 300 mm , 5 μm ) 　　chromatographic columns were used. The mobile phase was 0. 01 mol ·L - 1 citric acid (pH 3. 0 ) with flow rate of 1. 0 mL ·min - 1 . The column temperature was 35 ℃. The differential refractive index detector of Waters 2414 was used. Results 　　The linear range of free PEG was good in 5. 0 ~ 80 μg ·mL - 1 　　(r = 1 ) . The RSD of peak area of repeated sampling was 　　0. 46% , and the RSD of retention time of repeated sampling was 0. 23% . The average recovery was 101. 6% (n = 9 , RSD was 1. 92% ) . Conclusion　 The established method was simple , sensitive and accurate , and can be used for th