肠道屏障能评价及其技术 ppt课件.pptVIP

聚乙二醇法 易受渗透压影响，静脉注射后，回收率极低，临床使用意义不大。 糖分子探针 常用：尿乳果糖、甘露醇比值法，不能用于禁食病人，标本采集相对复杂，检测设备昂贵。 同位素 结果易受影响，准确性差，放射活性对人体损害较大。 方法学的局限，临床不适用 夏 阳,秦环龙《肠道屏障功能临床评估方法》 中国实用外科杂志, 2008, 28,11:1006-1008 * 4 1 D-乳酸测定 2 二胺氧化酶（DAO）测定 3 聚合酶链反应法（PCR） 细菌内毒素测定 5 脂肪酸结合蛋白（FABP） 结直肠肛门外科2009年第15卷第3期 ·207· 《肠屏障功能常用血清学检测现状及进展》 陈军亮1 樊志敏2 “肠道屏障功能的血清学检测是诊断肠道屏障功能障碍的重要依据，目前血IFABP， 细菌内毒素、血DAO与血D-乳酸的测定方法较为简单、快速、经济、实用，有望用于临床。” * D-乳酸 D-乳酸是肠道固有细菌的代谢产物，肠道内许多细菌均可产生（如大肠杆菌、乳酸菌、克雷伯杆菌等），其他组织既不能产生D-乳酸也不能代谢，所以血中的D-乳酸基本上来源于肠道。 在机体遭受严重创伤、休克、急性肠缺血、肠梗阻或其他原因引起的肠屏障功能受损时, 肠通透性增加，肠道细菌产生的大量D-乳酸透过受损的肠黏膜进入血循环，使血D-乳酸水平升高。因此，D－乳酸水平可作为临床检测患者肠道屏障通透性、 判断术后肠道内毒素和细菌移位的指标。 1、仅需采集微量血 2、操作简便、反应快速，适合临床的快速床旁检测和实时监测。 乔治, 黎沾良, 李基业, 等. 腹部外科手术后肠道细菌移位及肠道屏障的研究 [J]. 中华急诊医学杂志 2004 13(10): 664-666. DAO 二胺氧化酶(DAO)是一种含有脱胺的腐胺和组胺的细胞内酶，95%以上存在于哺乳动物和人小肠黏膜和纤毛上皮细胞中，大部存在于小肠黏膜，以空回肠活性最高，正常人血浆中含量很低。 肠黏膜细胞受损、坏死后该酶释放入血，导致血浆DAO活性增高。因此，测定血中DAO的活性可反映肠屏障粘膜损伤和修复的情况。 1.无创，只需采集微量血； 2.采用原研高灵敏度过氧化物酶显色和酶级联放大技术，加快反应速度，特别适合床旁快速检测。 Swank GM，Deitch EA． Role of the gut in multiplegan failurep： Bacterial translocation and permeabil changes[J] World Surg，1996，20(4)：41I-417． * 细菌内毒素 内毒素(LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁中的脂多糖，以肠杆菌属的细胞壁尤为多见，肠道是体内最大的LPS库，其主要来自于肠道细菌，由于健康人肠屏障功能完整其难于进入血循环。 当肠屏障功能受损时，LPS穿过肠黏膜进入血循环，形成LPS血症，LPS血症预测革兰阴性菌败血症的阳性预测值为48％，而没有LPS血症就可以预基本排除发生败血症的可能，阴性预测值为99％.检测外周血LPS水平，成为了解肠屏障细菌移位的重要手段。 1、仅需采集微量血 2、应用微量血液自动分离技术，外源性细菌毒素清除技术，指标特异性好，操作简单快捷，不受环境影响，特别适合快速床旁检测。 冯俊明，刘友，手晓东． 烧伤合并内毒素血症早期纤维连接蛋白在肾脏的分布及其意义． 第二军医大学学报，2005，20138．141． PCR 肠道细菌易位中最常见的是大肠杆菌，全血 DNA PCR。 1、优点：检测方法灵敏度高、 不受抗生素使用的影响、 能鉴别各种肠道细菌种类; 2、缺点：假阳性率高、 不能进行定量分析。 　按照规范进行的 PCR检测血液中肠源性细菌方法稳定，比血培养敏感。 * IFABP IFABP，主要存在于小肠的成熟肠上皮细胞胞液中，在胃和大肠中仅见微量，具有较好的组织特异性，正常情况下，IFABP在血清中的含量微乎其微。 肠缺血时细胞膜通透性增大，IFABP分子可通过细胞膜释放入血，而且血清IFABP在室温24h相当稳定，可保持活性的95％，便于检测。是早期诊断肠缺血的一个敏感指标，其水平的变化与创伤、炎症严重程度和胃肠功能障碍程度呈正相关，这种变化可能对创伤后胃肠功能障碍的早期预测有较重要意义。 1、国外有相应的检测试剂盒。 2、用Elisa方法测定，操作繁琐,不适合做定量。 （24h尿液中IFABP，样本收集时间长） 肠屏障功能障碍发生机制与诊断治疗 实用儿科临床杂志, 2007 , 22( 19 ) : 1514 – 1518