HPLC的保养和故障除液相应用.pptVIP

HPLC的保养和故障排除;HPLC的日常操作条件;泵的使用与维护注意事项;流动相的选择;溶剂的等级 HPLC级 优级纯 分析纯;溶剂纯度的影响;缓冲液的使用;流动相的过滤; 脱气 目的：除去流动相中因溶解或混合而产生的气泡 产生原因： 温度上升 压力下降 溶剂混合 ;流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯容器中，不能贮存在塑料容器中。 容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。 磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应临用现制。 容器应定期清洗，以除去底部的杂质沉淀和可能生长的微生物。;流动相过滤头产生的问题;流路中形成气泡引起的问题;1. 使用流动相溶解样品 -- 减少溶剂峰，尤其是组分峰靠近溶剂峰时由为重要 -- 保证样品在流动相中的溶解度，避免样品在系统中尤其在柱中产生沉淀 2. 进样前最好使用0.45um 的膜进行过滤 如果样品很脏，要使用0.2um的膜进行过滤;梯度洗脱;注意事项： 溶剂的纯度要高，否则梯度洗脱的重现性差，进行样品之前必须进行空白梯度洗脱 ，以辨认溶剂杂质峰。 梯度混合的溶剂互溶性要好 梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器（如紫外吸收检测器或荧光检测器），而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器（如示差折光检测器） 每次梯度洗脱之后要对色谱柱进行充分的平衡。;溶剂混合产生的问题;混合器;;输液泵发生故障及相应排除措施; ;进样器的保养;柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动;当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净 要注意流动相的脱气 避免使用高粘度的溶剂作为流动相 进样样品要提纯 控制进样量 每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品 每天工作结束后用适当的溶剂来清洗柱 当分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存;噪音高或基线漂移;出现“鬼峰”;出现肩峰或 前延峰;峰形展宽;出现脱尾峰;出现双重峰或 分叉峰;保留时间变长;保留时间缩短;保留时间 无规则改变;检测器的保养;避免问题