遗传实三验课总结.ppt

有丝分裂;2）预处理： a：目的： 为了有利于对有丝分裂中染色体的观察和计数，在固定之前应用理化因素进行预处理，这样可以改变细胞质的粘度，抑制或破坏纺锤丝的形成，促使染色体缩短和分散等。 b：预处理方法： 低温预处理：剪取黑麦根尖放入盛有蒸馏水的指形管中，再将指形管置于冰水共存的冰瓶中，将冰瓶置0-3度冰箱处理24小时。染色体数较多的材料可适当延长处理时间。 ;３）固定： a:目的：采用各种渗透力强的固定液将植物的组织、细胞迅速杀死，使蛋白质沉淀并尽量保持其原有状态。 b:固定液的配制： Carnoy ’s固定液: 冰醋酸：纯酒精＝1:3 固定时间：24hr;4）解离、染色 解离：酸解法；用清水冲洗根尖几次，将根放入1mol/L盐酸溶液中。解离是为了使胞间连丝离解掉，使细胞分散，便于压片。 染色： 染液：醋酸洋红 将根取出后，用清水冲洗几次，冲掉残留在组织间地酸。用醋酸洋红染色。 5）制片 取一条根置于载玻片上，切取根尖分生组织约0.5mm，大小2-3段—加一滴醋酸洋红—盖上盖玻片—用挑针尖轻敲根尖材料成雾状—用拇指轻压材料—镜检 ;减数分裂;中期Ⅰ：核仁和核膜消失，所有二价体排列在赤道板两侧，细胞质里出现纺锤体，每个二价体的两条染色体的着丝点分别趋向纺锤体的两极，此时最适于计数染色体的数目和观察各染色体的形态特征。 第一次减数分裂后期完成染色体数目的减半。;二分体：减数分裂末期I出现，一个细胞分裂形成两个染色体数目减半的子细胞。 四分体：减数分裂II末期形成，最终形成四个配子。 ;1. 取材及固定： 取材的时间及材料大小必须十分恰当，才能获得更多的花粉母细胞分裂相，以供观察。 蚕豆：蚕豆现蕾后，于上午8～10时（视气温而定，但必须在上午11时前）摘取茎顶有效花序，将周围小叶与苞叶去掉，将花苞放入卡诺固定液中。 ;2.染色制片： 取出经固定的花苞，至于吸水纸上，吸去保存液或固定液，移至载玻片上，剥出花药。用解剖针截断花药。轻轻挤压，使花粉母细胞在切口处散出。滴一小滴醋酸洋红染色液。 用镊子把药壁夹碎——将细胞壁残渣除去—静置染色5～10mim——再盖上盖玻片——后用挑针背部或铅笔橡皮头处轻敲——用拇指压片——镜检;;;;果蝇唾腺染色体的观察 ;双翅目昆虫的幼虫期都具有很大的唾腺细胞。 因为这些细胞发育到一定阶段后就不再进行有丝分裂，停止在间期。但是染色质还是不断地复制，形成约1000~4000拷贝的染色质丝，比普通的有丝分裂中期的染色体大得多，称为多线染色体和巨大染色体。; 巨大，是多线染色体； 正常：间期DNA复制 两条染色单体 着丝点裂开 子染色体 核分裂 胞质分裂 果蝇：有丝分裂停止在分裂间期，DNA不断自我复制，着丝点不裂开 同源染色体紧密配对：体细胞联会，所以染色体只呈现单倍数； 形成染色中心，从染色体中心处伸出5条长臂，1条短臂； 染色后，出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的横纹。 这些横纹的数目、位置、宽窄及排列顺序都具有种的特异性。一旦染色体上发生了缺失，重复，倒位，易位等，也可较容易地在唾腺染色体上观察识别出来。可见唾腺染色体技术是遗传学研究中一项基本的技术。 ;;1、幼虫选取 果蝇的三龄幼虫活体 当幼虫爬上瓶壁准备 化蛹前，即为三龄幼 虫。 肥大、行动迟缓。;取三龄幼虫，置于载玻片上，并滴加一滴生理盐水，观察幼虫结构：具一钝尾和带黑色口器的尖头端 ;2、腺体剖取： ;3 染色：用1%醋酸洋红染色10~20min。;;; 果蝇的杂交试验;生活史的观察;? 图3-1??果蝇生活史 1．卵???2．一龄幼虫????3．二龄幼虫????4．三龄幼虫????5．蛹 6．成虫(雄)????7．成虫(雌)? ;雌雄果蝇的比较：1．体型?? 雌果蝇体型较大，雄果蝇较小；2．腹部末端?? 雌性腹部椭圆，末端稍尖，雄性末端钝圆；3．腹部背面?? 雌性有明显5条黑色条纹，雄性有三条，前两条细，后一条宽，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点。4．腹部腹面?? 雌性有较明显的6个腹片，雄性有4个腹片。5．性梳?? 雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳（图3-3），雌性则无。性梳的有无，是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一。 ;左：雄性果蝇的左前足?? 中：跗节基部的性梳??? 右：雌果蝇无性梳 ;白眼;翅形性状;刚毛性状; 我们实验课涉及的果蝇类型： 黑体：黑体、红眼、长翅、直刚毛 三隐性：灰体、白眼、小翅、卷刚毛 野生型：灰体、红眼、长翅、直刚毛 ;处女蝇;分离规律 一对等位基因的杂合子中，各自保持其独立性，在配子形成时，