e-选择素和细胞间粘附分子-1反义寡核苷酸对人脐静脉内皮细胞与单核细胞粘附功能的影响-疫学专业毕业论文.docxVIP

MCP-1 monocyte chemoattractant protein一1单核细胞趋化蛋白一1 PDGF——A platelet——derived growth factor A MAPK mitogen—’activated protein kinase ATIR angiotensin II type 1 receptor 血管紧张素II 1型受体 Hepes 4一(2-hydroxyerhyl)piperazine—l—erhanesulfonic acid 4一羟乙基哌嗪乙磺酸 CD cluster of differentiation 分化抗原簇 PE R—phycoerythrin 藻红蛋白 FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 PC5 R—phycoerythri n—Cy5 藻红蛋白偶联物 OD optical density 光密度 NF-K B nuclear factor——K B 核因子一K B 2  学位论文原创性声明和版权使用授权书 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行 研究工作所取得的真实成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何 其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡 献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法 律结果由本人承担。 作者签名(手写)： 导师签名(手写)： 阳台年莎月污日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查 阅和借阅。本人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入 有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本 学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 作者签名。手写，：—乏垒墨∑ 导师签名。手写，： 煎争上月 f弓日  E一选择素和细胞间粘附分子一1反义寡核苷酸 对人脐静脉内皮细胞与外周血单个核细胞粘附功能的影响 摘 要 目的： 探讨E一选择素(E—selectin)和细胞间粘附分子一1(ICAM一1)反义 寡核苷酸(asODN)及其与辛伐他汀(simvastatin)联合应用对人脐静脉内皮细 胞(HUVEC)ICAM-I和E-selectin表达的抑制和对外周血单个核细胞粘附的影 响。 方法：原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，并传代；应用脂质体转染法将 人工合成E—selectin asODN和ICAbi一1 asODN分别导入HUVECs；实验共分8组， 分别为空白对照 (basal)组、TNF—Q诱导组、liposome对照组、 1 i posome—contr01 asODN组、裸asODN(nude asODN)组、脂质体asODN (1ipo-asODN)组、simvastatin处理组、1ipo-asODN与simvastatin联合组， 除空白组外，其余7组均以TNF一Ⅱ诱导内皮损伤；以流式细胞技术测定HUVECs 细胞膜E-selectin和ICAM-I蛋白的表达；以RT-PCR半定量技术测定HUVECs E-selectin mRNA和ICAM-I mRNA的表达；以细胞粘附试验测定HUVECs与单个 核细胞的粘附率；应用辛伐他汀预先处理HUVECs，再用E—selectin 1 ipo—asODN 和ICAM—l lipo—asODN转染HUVECs，观察E—selectin asODN和ICAM一1 asODN 与辛伐他汀联合应用对HUVECs E-selectin和ICAM一1的表达以及对HUVECs与 外周血单个核细胞粘附抑制的影响。 结果：(1)与TNF—Q诱导组相比，E-selectin asODN和ICAM-I asODN以及 E-selectin 1ipo—asODN和ICAM-I 1ipo-asODN均明显降低了HUVECs相应的 E-selectin和ICAM-I蛋白及mRNA的表达(PO．01)；(2)E—selectin asODN和 ICAM-I lipo—asODN与simvastatin联合应用可降低对HUVECs相应的E—selectin 和ICAM-I的蛋白及mRNA表达；(3)1ipo-asODN与simvastatin联合组与 1ipo-asODN组比较，E-selectin表达水平显著下降(PO．01)，而ICAM一1的表 达水平下降无显著意义(PO．05)，表明E—selectin 1ipo—asODN与