肉碱的测定.docVIP

保健食品中肉碱的测定 1 范围 本方法规定了片剂、胶囊保健食品中肉碱的测定方法。 本方法适用于以肉碱为主要原料的片剂、胶囊中肉碱的测定。 本方法最低检出量为 0．27μg。 本方法最佳线性范围：0.050mg／mL—2.0mg／mL。 2 原理 试样中的肉碱以 0.5mmol／L 的盐酸超声提取，反相色谱分离，与标准品的保留时间比较定性，以峰面积外标法定量。 3 试剂 除特殊说明，所用试剂均为分析纯。实验用水为去离子水或同等纯度的蒸馏水。 3．1 磷酸氢二钾。 3．2 辛烷磺酸钠。 3．3 0.50mmol／L 盐酸。 3．4 肉碱标准溶液：精密称取干燥至恒重的肉碱标准品(含量 98％)0.0200g，用0.50mmol／L 盐酸溶解并定容为 10.0mL，此溶液浓度为 2.0mg／mL。 4 仪器 4．1 HPLC 系统，配有紫外检测器和色谱工作站。 4．2 超声波提取器。 4．3 溶剂微孔过滤器带 0.45μm 水相滤膜。 5 分析步骤 5．1 试样预处理：准确称取粉碎并混合均匀的试样 0.50g(含肉碱约 40mg)；液体试样取 5.0mL， 于 50mL 容量瓶中，加入 0.50mmol／L 盐酸约 35mL，超声提取 10min，用 0.50mmol／L 盐酸定容，混匀，过滤，弃初滤液数毫升，收集滤液，过 0.45μm 水相滤膜，为试样处理液。供HPLC分析。 5．2 试样分析 5. 2. 5．2．2 流动相：0.05mol／L(3.4g)磷酸氢二钾溶液，0.002mol／L 辛烷磺酸钠；10％乙腈； pH2．5。 5．2．3 流速：0.8mL/min。 5．2．4 检测器：紫外检测器；检测波长： 210nm。 5．3 标准曲线：分别取标准溶液 0.0，0.25，0.50，1.0，2.0，2.5，5.0mL 标准溶液(3.4)于 5mL 比色管中：用 0.50mmol／L 盐酸稀释并定容为 5.0mL，分别进样20μL 进行色谱分析。 用标准浓度一峰面积绘制标准曲线。 5.4 试样测定：取 20μL 试样处理液(5.1)注入色谱仪中，以保留时间定性，面积定量。 5.5 色谱图 5.6 分析结果表述 试样中肉碱的含量按5.6.1 式计算 5.6.1 计算 式中： x-为试样中肉碱的含量，mg／g； m-为试样质量，g： C-为试样处理液中肉碱的浓度，mg／mL； V-为试样处理液体积，mL。 5.6.2 结果表示 结果保留三位有效数字。 6 技术参数 重复测定值的 RSD 小于 6.0％。 回收率：90.3-101.1％。