利用圆二色谱和流式细胞术分析干扰素-α构象和其抗病毒.PDFVIP

生 物 工 程 学 报 胡茂志 等/利用圆二色谱和流式细胞术分析干扰素-α的构象与其抗病毒活性的相关性 1651 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn November 25, 2015, 31(11): 1651−1659 DOI: 10.13345/j.cjb.140628 ©2015 Chin J Biotech, All rights reserved 生物技术与方法 利用圆二色谱和流式细胞术分析干扰素-α的构象与其 抗病毒活性的相关性 1,2,3* 4* 1 1 1 1,2 4 1,2 胡茂志 ，李文华 ，严秋香 ，杨艳 ，孙庆 ，潘志明 ，崔桂友 ，焦新安 1 扬州大学 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏 扬州 225009 2 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室，江苏 扬州 225009 3 扬州大学 江苏省动物预防医学重点实验室，江苏 扬州 225009 4 扬州大学旅游烹饪学院 (食品科学与工程学院) ，江苏 扬州 225009 胡茂志, 李文华, 严秋香, 等. 利用圆二色谱和流式细胞术分析干扰素-α的构象与其抗病毒活性的相关性. 生物工程学 报, 2015, 31(11): 1651–1659. Hu MZ, Li WH, Yan QX, et al. Relationship of interferon-α between its conformation and anti-viral property analyzed by circular dichroism and flow cytometry. Chin J Biotech, 2015, 31(11): 1651–1659. 摘 要: 利用圆二色谱 (Circular dichroism ，CD) 和流式细胞术 (Flow cytometry ，FCM) 分析干扰素 (Interferon ， IFN)-α的构象与其抗病毒活性之间的关系。以重组人IFN-α (rIFN-α2b 和rIFN-α2a) 为材料，变温CD 谱分析表明， 在65 ℃以下，两种IFN-α的二级结构相对稳定，当温度高于65 ℃以后，两者的二级结构发生不可逆的改变。FCM 分析构象变化前后 IFN-α 的抗病毒活性发现，构象的改变一定程度上减弱了其抗病毒活性。rIFN-α2b 和 rIFN-α2a 具有相似的变化趋势。以上结果表明，IFN-α的构象是影响其抗病毒活性的重要因素之一，同时也验证了CD 结合 FCM 是分析蛋白质药物构象与其细胞水平上生物学活性相关性的较好组合。 关键词: 圆二色谱，流式细胞术，干扰素-α，构象，抗病毒活性 Received: December 19, 2014; Accepted: March 23, 2015 Supported by: National Natural Science Foundation of China (No. , Analysis and Test Research Project of Jiangsu New Technology and Method (No. BZ201208), Open Project of Key Laboratory of Jiangsu Preventive Veterinary Medicine (No. K13040). Corresponding authors: Xin’an J