胚胎工三程复习.pptVIP

知识网络构建: * * * * * * * * * * * .讨论,买一头公牛\母牛,进行胚胎工程 卵子采集 精子采集 精子体外获能 MⅡ中期 早期胚胎的培养 体外受精 移植到代孕母体子宫 胚胎移植 试管动物 卵子体外培养 3.2 体外受精和早期胚胎培养 实验动物（小鼠、兔） 家畜（猪羊） 大家畜（牛） 大型动物 促性腺激素处理 输卵管冲取卵子（超数排卵） 屠宰厂卵巢取卵 活体采卵 卵子采集 温度、湿度、压力 手握法 电刺激法 假阴道法 精子采集 精子获能的方法 一定浓度的肝素 钙离子载体A23187溶液 人工配制的获能液中培养 ：化学诱导法 啮齿动物、兔和猪 ：培养法 牛、羊 体外受精 或受精液 胚胎 发育培养液 受精卵 获能液 获能的精子＋MII中期的卵子 去除精清 体外受精 获取精子、卵子 卵母细胞培养和精子获能 体外受精 早期胚胎培养 早期胚胎培养 还需要其他什么条件? . . 无机盐和有机盐类，维生素、 激素、氨基酸、核苷酸，还有血清 本质： 要提供哪些营养物质? 无菌无毒环境、温度、 酸碱度、气体环境 动物细胞培养 将雌性动物体内的早期胚胎,或者体外受精及通过其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。 1.概念: 3.3 胚胎工程的应用及前景 一、胚胎移植 雌性动物的早期胚胎 提供胚胎的个体。 接受胚胎的个体。 同种、生理状态相同。 胚胎的来源： 供体： 受体： 受体的条件： 或体外受精及其他方式得到的胚胎。 概念解读 体内受精 体外受精 胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。 2、胚胎移植的本质 3、胚胎移植的现状和意义 1)加速育种工作和品种改良； 2)大量节省购买种畜的费用； 3)一胎多产； 4)保存品种资源和濒危物种； 5)可充分发挥优秀个体的繁殖潜能缩短繁殖周期,增加一生繁殖的后代数量。 怎样确保胚胎移植能成功? 移动到任何一头动物子宫内都能发育吗? 同种动物发情排卵后,在一段时间内供体\受体具有相同的生理环境 为什么能收集到胚胎? 早期胚胎一段时间内处于游离状态 供体和受体会不会发生排斥/ 同种动物之间基本上不排斥 为什么移植的胚胎能保留供体双亲的特性? 胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系, 但遗传特性不受受体的影响 . 4、生理学基础 （1）对供体、受体进行选择;同期发情处理 同期发情： 遗传性能和生产性能 优秀的个体； 供体母牛： 受体： 健康和正常繁殖能力的个体 处理： 4、胚胎移植的基本程序 （2）采集卵母细胞 超数排卵 方法： 具体做法： 注射促性腺激素 （3）配种或人工授精 同种优良的雄性动物。 精子来源： 受精部位： 输卵管 （4）胚胎的收集 方法： 冲卵 冲卵冲出的是卵子吗？ （5）对胚胎进行质量检查 此时胚胎处于什么时期？ 桑椹胚或囊胚 （6）胚胎的保存或移植 保存条件： -196℃的液氮 （7）胚胎的移植 方法一：手术法 具体做法：引出受体子宫和卵巢，将胚胎注入子宫角，缝合创口。 方法二：非手术法 将装有胚胎的移植管送入受体母牛子宫的相应部位，注入胚胎。 （8）对受体母牛进行是否妊娠的检查 （9）受体母牛产下胚胎移植的犊牛 选择 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种受精 冲卵 质量检查、培养 胚胎移植 妊娠检查 分娩（胚胎移植的犊牛） 总结： 采用机械方法将早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,经体内或体外培养后植入受体，以得到同卵双胎或同卵多胎的技术。 [可看作是动物无性繁殖或克隆] 1.概念: 2、理论基础 动物胚胎细胞的全能性。 二、胚胎分割 3、选择的胚胎： 发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚 4、分割工具： 分割针或分割刀 借助仪器： 实体显微镜和显微操作仪 5、具体操作 用分割针或分割刀片将胚胎切开 吸出其中的半个胚胎，注入 预先准备好的空透明带中 或直接将裸半胚移植给受体 注意事项： 要将内细胞团均等分割 .半裸胚直接移植, 均等, 为什么只能2份 .还存在什么问题 . .性别鉴定2 为什么选择滋养层的细胞来做性别鉴定 6、胚胎分割技术的缺陷 （1）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异； （2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。 简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。 体积小.细胞核大,核仁明显 2.特点: 具有发育的全能性.可分化为成年动物体内任何一种组织细胞 （1）形态： （2）功能： 1.概念： （3）在体外培养的条件下