植物细胞得工程课程.ppt

植 物 细 胞 工 程 plant cell engineering 植物细胞的构造 主 要 内 容 第一章：绪论 第二章：第二章 植物细胞的全能性及其表达 第三章：体细胞胚发生的细胞生物学基础 第四章：植物细胞及组织培养 第五章：原生质体培养和细胞杂交 第六章：植物单细胞培养和次生物质生产 主要参考书 主要参考书 第一章 绪 论 §1-1 植物细胞工程的概念和任务 一.基本概念 以植物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖 和人为操作，改变细胞的某些生物学特性，从而改良品种 加速繁育植物个体或获得有用物质的技术。 二.植物细胞工程的研究内容 1、细胞培养(Cell Culture)：单细胞或小的细胞团(6～7个细胞)、花粉及花药、原生质体（Protoplast Culture）等。 2、胚胎培养(Embryo culture)：Ovule、幼胚、成熟胚、Endosperm的离体培养。 3、组织培养(Tissue culture)：根组织、茎组织、叶肉组织、中柱鞘、形成层、髓组织、贮藏薄壁组织（大蒜瓣、洋葱鳞茎、百合鳞片）、 珠心组织等。 4、器官培养(Organ culture)：Root、Shoot、Leaf、Flower、Fruit以及各部原基(芽原基、根原基)的培养。 5、细胞改造：细胞拆分、染色体转移、基因转移。 三.植物细胞工程研究的任务 1、研究植物器官、组织和细胞在离体培养条件下,所需要的有机营养、无机营养、植物激素等营养条件；所需的光、温、氧等环境条件－－组培快繁、单倍体育种、抗性细胞系的诱变筛选、原生质体培养、细胞杂交、超低温冷冻贮藏种质保存、人工种子制造和细胞改造等 2、研究不同生理年龄、遗传组成(基因型)的外植体在离体培养条件下进行形态发生的规律－－植物生理生化、遗传、发育生物学机理等研究，最终获得转基因植物及其产品。 4、培养细胞生长与产物合成动力学研究－－细胞规模化培养与工业化生产。 思考题： 1．植物细胞工程的研究内容包括哪些方面？ 2．未来植物细胞工程研究的任务将涉及哪些方面？ 第二章 植物细胞的全能性及其表达 §2-1 植物细胞全能性(Totipotent) 一、概念 植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性,在一定条件下如 同受精卵一样,具有发育成完整植物体的潜在能力。 (1)植物细胞无论是体细胞还是生殖细胞,均具有该物种全 部的遗传信息。 (2)每个植物细胞均具有发育成完整植物体的潜在能力。 二、全能性实现的基本方式 1、生命周期：以裸孢子体和配子体的世代交替来实现； 2、细胞周期：DNA复制、转录mRNM并翻译为蛋白质，使细胞全能性得以形成和保持。 3、组织培养周期：在离体培养条件下通过细胞脱分化与再分化来实现全能性。 三.离体条件下全能性实现的基本途径 （一）细胞脱分化和再分化的概念 ◆ 细胞脱分化(Dedifferentiation),即失去已分化细胞的典型特征,或消除了细胞分工,使之回复到分生组织状态,或胚性细胞状态,即细胞脱分化。 ◆细胞再分化(Redifferentiation)即在离体培养下,重新恢复细胞分化能力,并经历器官发生和胚胎发生，形成单极性的芽、根或形成双极性的胚状体(Embryois),进一步发育成完整植物体的过程。 （二）植物细胞脱分化和再分化的条件 1、机械隔离与生理隔离 把器官、组织或细胞从整体植物上分离下来。 作用：脱离整体,消除整体遗传信息的制约。 意义：促进细胞、组织和器官的脱分化，使“全能性”得以表达。 2、植物激素的作用 ●生长素的作用 促进胞质分裂，启动细胞分裂。 机理：它与含精氨酸高的组蛋白结合,使一部分受阻遏的基因解除抑制状态而活化,从而恢复转录(合成mRNA)和转译, 最终形成酶和蛋白质。 ●细胞分裂素的作用: 促进RNA合成与核分裂，使已经脱分 化的细胞或细胞团保持持续有丝分裂。 机理：作为tRNA反密码子附近的一个 碱基组分,并由此控制特殊mRNA的合成来 促进细胞的分裂。 ● 2,4-D的作用 促进培养细胞的脱分化和愈伤化。 §2-2. 细胞极性与胚状体 一、细胞极性（polarity） 是指细胞、器官和植株的两个极端在形态结构和生 理生化上存在差异的现象。主要表现在细胞质浓度的差 异、细胞器数量的多少、核位置的偏向等方面。极性的 建立会引发不均等分裂。 极性是细胞分化的前提。 荠菜胚的形成 墨角藻受精卵极性建立过程 二、胚状体 1、胚状体的概念 离体培养条件下胚状体起源于一个非合子细胞，它经历 胚胎发育过程所形成的类胚结构。