HIF1α SOCS3 Bax在脏性猝死心肌中的表达和甲醛固定石蜡包埋尸检组织中提取DNA的分析.docxVIP

HIF．1仅、SoCS．3、Bax在心脏性猝死心肌中的表达和甲醛固定石蜡包 HIF．1仅、SoCS．3、Bax在心脏性猝死心肌中的表达和甲醛固定石蜡包 埋尸检组织中提取DNA的研究 摘要 第一部分HIF．1n、SoCS．3、Bax在心脏性猝死心肌中的表达 目的检澳IJHIF．10t、SOCS．3、Bax在心脏性猝死者心肌中的表达及其与心脏性猝死的关系，并探 讨HIF．10t、Bax相关性，进而为法医学鉴定心脏性猝死提供客观依据。 方法选取25例心脏性猝死者为实验组，25例非心脏性猝死者为对照组。应用免疫组织化学方法 检钡tJHIF．1a、SOCS．3、Bax在心肌中的表达。 结果 1．常规HE染色：在心脏性猝死组中冠心病猝死者20例均可见心肌纤维断裂，心肌间质水肿， 间质内见少量出血及淋巴细胞浸润，心肌间质纤维结缔组织增多，部分心肌细胞肥大并脂肪浸 润，嗜伊红性增强，部分心肌细胞灶性变性、坏死，细胞轻度水肿，部分心肌细胞核轻度增大， 并见畸形核，染色质疏松。冠状动脉左前降支、左旋支、右冠状动脉均见内膜增厚，管腔狭窄 程度均50％，部分管腔闭塞，部分管腔血栓形成。 2．免疫组织化学染色： (1)心脏性猝死组每例心肌细胞中可见HIT．1a阳性表达，位于细胞浆中；阴性对照组仅有3例心 肌细胞中可见HIF．1a阳性表达，余为阴性；心脏性猝死者心肌HIF．1a的表达明显高于对照组 (Uc=6．083，P0．01)。 (2)心脏性猝死组中有22例心肌细胞中可见SOCS一3阳性表达，位于细胞浆中；阴性对照组仅有2 例心肌细胞细胞可见阳性表达，余为阴性；心脏性猝死者心肌SOCS．3的表达明显高于对照组 (Uc=5．8306，P0．01)。 (3)心脏性猝死组每例心肌细胞中可见Bax阳性表达，位于细胞浆中；阴性对照组仅有3例心肌细 胞中可见Bax阳性表达，余为阴性；心脏性猝死者心肌Bax蛋白的表达明显高于对照组 (Uc=5．573，P0．01)。 (4)在心脏性猝死心肌组织中，HIT—la表达与Bax表达呈正相关(rs=O．736，P0．01)。 结论 1．HIT．1a是反映心肌缺氧、缺血的非常敏感的指标，心脏性猝死患者心肌中HIT．1a的表达在急 性心肌缺血早期显著增加。HIF．1a可作为一个早期心肌缺血的敏感的辅助诊断指标，并用于急性 心肌缺血缺氧性死亡和其他原冈(例如窒息)缺氧造成的死亡的鉴别。 2．心脏性猝死患者心肌中SOCS一3的表达在急性心肌缺血早期显著增加，提示它可能参与了心 脏性猝死的发病机制，可能成为诊断心脏性猝死的早期、快速、灵敏的病理形态学辅助指标。 3．Bax在心脏性猝死患者心肌中有阳性表达，表明在心脏性猝死的心肌缺血中有凋亡调控机制 参与。Bax的表达是心肌缺血的早期表现，可能成为诊断心脏性猝死灵敏、可靠的辅助诊断指标。 4．HIF—la与Bax表达的增高与心脏性猝死的发生可能有一定的相关性，二者可能在心脏性猝死 的病理变化过程中起协同作用，共同参与调控心肌细胞的凋亡。HIT．1a可能调控Bax，进而促进 心肌细胞凋亡。 删Y 删Y ㈣2㈣0 蕈霎4 ㈣3 。川5 洲5 ㈣5 第二部分甲醛固定石蜡包埋尸检组织中提取DNA的研究 目的比较甲醛同定石蜡包埋尸检组织中3种提取DNA的方法对DNA质量的影响，寻找一种 操作简便、污染较少、经济实用的石蜡包埋尸检组织中提取DNA的方法。 方法取尸检存档的经甲醛固定石蜡包埋的心肌组织10例，分别以二甲苯脱蜡．酚氯仿法、改良 TES水浴脱蜡．酚氯仿法、试剂盒提取DNA法提取其DNA，然后进行电泳分析、紫外分光光度 计测定A260／A280比值及PCR扩增。 结果二甲苯脱蜡．酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡．酚氯仿法提取效率相同。改良TES水浴脱蜡． 酚氯仿法抽提DNA法、二甲苯脱蜡．酚氯仿法分别与试剂盒法所提取DNA的A260／A280值相 比较，差异有显著性意义(Po．01)。以改良TES水浴脱蜡．酚氯仿法所得DNA为模板，扩增的 目的条带亮度与阳性对照相当。 结论结果证实改良TES水浴脱蜡一酚氯仿法简便有效，所用试剂价格低廉，是一种经济实用的 甲醛固定石蜡包埋尸检组织DNA提取方法。 硕士研究生：刘德衍(法医学) 导 师：于建宪教授 关键词：法医病理学?缺氧诱导因子lalphaT细胞因子信号转导抑制因子_3 7人Bcl-2相关x 蛋白，免疫组织化学 The The Expression of HIF—-la,SOCS·-3 and Bax in Myocardium in the Cases of Sudden Cardiac Death and Study on DNA Extraction from Formalin-·Fixed and Paraffin--Embedd