基于plectin1靶向分子探针在胰腺癌mri诊断中的应用-影像医学与核医学专业论文.docxVIP

万方数据 参考文献 ··········································································································· 43 综 述 ··············································································································· 48 致 谢 ··············································································································· 58 攻读学位期间发表的学术论文 ······································································ 59 原创性声明 ·····················································································??················· 60 泰山医学院硕士学位论文 基于 Plectin1 靶向分子探针在胰腺癌 MRI 诊断中的应用 研究生：周 浩 专 业：影像医学与核医学 导 师：刘林祥 教授 王中秋 教授  第一部分 中文摘要 Plectin1 双模态靶向分子探针的构建及性能检测  目的 合成磷脂聚乙二醇修饰的磁性纳米颗粒(DSPE-PEG·SPIONs)，并对其性能进行表 征，进而构建基于 Plectin1 磁性及荧光双模态的靶向分子探针 ICG-anti-Plectin1-DSPE- PEG·SPIONs。 材料与方法 1、油溶性 SPIONs 的合成：将乙酰丙酮铁、二卞醚、油酸及油胺以适当比例混 合，在氮气条件下加热至 220℃，维持适当时间继续加热至 290℃，维持一定时间后 降至室温。将产物置于强磁场上，并向其中加入乙醇反复清洗，继而向溶液中加入氯 仿，溶解 SPIONs 纳米颗粒，室温下保存备用。 2、DSPE-PEG·SPIONs 的合成：取上述溶液与 DSPE-PEG·SPIONs 的氯仿溶液， 混合均匀后再加入适量去离子水，70℃水浴条件旋蒸 15 分钟。用去离子水将 SPIONs 溶解，置于高速离心机(3000rpm/min,5min)离心，用去离子水洗涤并进行探头超声。 用 220nm 滤膜过滤上述 DSPE-PEG·SPIONs 水溶液 2~3 次，再用 100nm 滤膜过滤 1~2 次，4℃保存备用。 3、ICG-anti-Plectin1-DSPE-PEG·SPIONs 靶向分子探针的构建：量取适当浓度的 DSPE-PEG·SPIONs 与 MES 缓冲液混匀呈 1ml 的均匀溶液，继而向所得溶液中分别加 入 67μl 的 EDC 溶液及 120μl 的 Sulfo-NHS，将溶液放入恒温振荡器振荡在 150rpm 条 件下振荡 30 分钟，取出置于超滤离心管中高速离心(4000rpm,3min)2~3 次，离心过程 中用 0.02M 的硼酸盐溶液清洗，终溶液配制成 1ml 的硼酸盐 DSPE-PEG·SPIONs 溶 液。向上述溶液中加入浓度为 0.5mg/ml 的 anti-Plectin1 抗体 6.84μl，置于摇床 4℃条 1  件下 100rpm 过夜反应，再向溶液中加入 1mg/ml ICG 100μl，反应过夜，取出后用 0.1g/ ml 的 BSA 将其封闭，4℃保存备用。 4、DSPE-PEG·SPIONs 的性能表征：应用透射电子显微镜(TEM)和高分辨率透射 电子显微镜(HRTEM)观察纳米颗粒的粒径及晶体结构，振动样品磁强计(VSM)测试磁 颗粒的磁学性质，傅里叶变换红外光谱 (FTIR) 法分析纳米颗粒表面基团，测量 DSPE-PEG·SPION 的水动力尺寸及 DSPE-PEG·SPIONs 的胶体稳定性，采用邻二氮菲 法测定铁浓度，进行小鼠体内预实验。 结果 TEM 及 HRTEM 显示 DSPE-PEG·SPIONs 的核心粒径在 9nm~15nm 之间，平均粒 径 12nm，分散性好；振动样品磁强计(VSM)的磁性分析显示 DSPE-PEG· SPIONs 余 磁为 0，为超顺磁性材料，其饱和的磁化强度为 49.9 emμg-1，适合作为 MR 成像的 对比剂；傅立叶红外(FTIR)结果表明 DSPE-PEG-COOH 成功包覆在 Fe3O4 磁颗粒的 表面；体外弛豫曲线测量的