种曲质量观察.docVIP

种曲质量观察 1取培养成熟种曲于光线较强处观察菌丝生长情况和孢子色泽。 2取少量种曲闻是否有曲香。 3取种曲掰开看内部是否有夹生或白心现象。 4观察整批种曲，观察是否有与种曲菌丝孢子色泽不吻合的其他杂菌存在，记录形态大小特征色泽。 检查记录每批种曲感官质量。 种曲记录培养时间、温度、配料记录、翻曲记录。化验检测水分、孢子数、孢子发芽率。 种曲孢子数不足或者孢子繁殖力差，易造成污染。曲料含水高，培养温度高，湿度大，氧气供给不适都易造成污染。种曲培养中温度超过37℃易生水毛（毛霉），低于28℃易染青霉，青霉在较低温度下容易繁殖，菌从绿色，大量繁殖后产生霉臭气味。制曲主要污染的细菌为小球菌，该菌好气。繁殖速度较霉菌酵母快。枯草芽孢杆菌，耐热，污染后会造成曲子发粘，严重时有异臭，产生氨味。 种曲外观：外观无杂菌，孢子整齐旺盛，无夹心，无青霉及其他异色，孢子数达到30亿/克以上，发芽率在90%以上，杂菌8千万/克以下。 种曲外观：外观无杂菌，孢子整齐旺盛，无夹心，无青霉及其他异色，孢子数达到30亿/克以上，发芽率在90%以上，杂菌8千万/克以下。水分少则孢子少而瘦弱。 白曲麦芽汁培养基，菌从为肉桂色，菌丝无色，孢子球形，发育适温32--35℃，有生酸能力。 生产菌种性能衰退、退化检查 霉菌菌丝不健壮，产孢子数减少，生产性能减弱，菌落颜色变深，斜面试管生长缓慢，菌落形态改变。制曲培养时曲料发硬 红曲霉色度降低。白曲颜色变深。 酵母菌出芽缓慢，或不出芽而形成孢子。 酵母菌落正常光环湿润，退化后出现褶皱型，菌落变小。显微镜出芽不规则，细胞形态不规则。 菌种退化最易观察菌落和细胞形态改变。 培养基的配制与灭菌 器皿的清洗 1新玻璃器皿含有游离碱，一般先将其在2%盐酸溶液中浸泡数小时，再用水清洗干净，也可将器皿先用热水浸泡，再用去污粉或肥皂粉刷洗，再经热水洗刷，自来水清洗。 2用过的玻璃器皿，若盛有废弃物，先经高压灭菌后清洗，对只带有细菌标本或培养物的器皿，用过后应立即将其浸泡于2%来苏水中经24小时再取出清洗。 对于普通培养基必须煮沸30分钟后在清洗。 用蜡封口的试管先高压蒸汽灭菌，然后取出趁热拔去粘有蜡的棉塞，立即倒去培养物，再将试管放入温水稍加洗刷后放入5%肥皂水内煮沸5分钟去除油污后清洗。 加过消泡剂或者做过通气培养的大三角瓶，一般将倒空的瓶子用碱粉或10%火碱水刷洗后再用水洗。 管壁上粘有培养物，用试管刷难以去除，可以铁丝绑上纱布，润湿后沾去污粉擦洗。 吸过菌液的吸管，用完后应放在5%石炭酸溶液内消毒，未吸过菌液的吸管用后放于清水中防止干燥。吸过带油液体的吸管应先在10%氢氧化钠溶液中浸泡半小时，去掉油污再清洗。 培养基的制备 大致过程 配料—溶解—校正PH—加凝固剂—融化—过滤—分装—加棉塞—包扎—灭菌—无菌检查 1溶解配料 制备培养基先在烧杯中加入所需水量的一半，按配方称取各种材料依次加入水中，逐个溶解，最后加足水量。在加料过程中，各种成分溶解的次序先加缓冲化合物—主要元素—微量元素—维生素等 2调PH配料溶解完毕，冷却到室温，再加入酸或者碱。要缓慢少量，多加搅拌，防止局部过酸过碱而破坏营养成分，常用10%氢氧化钠和6摩尔/升盐酸调PH 3配置固体培养基时，需加入琼脂或者明胶等凝固剂。若以琼脂为凝固剂，将琼脂加入煮沸的培养基中，不断搅拌至溶化，最后补足蒸发的水分。 4过滤，在两层纱布中加脱脂棉，趁热过滤。 5分装，装入试管的固体培养基不易超过试管高度的1/5。装入三角瓶中的液体培养基不超过总体积的一半。切勿使培养基沾污试管口和瓶口。 6包扎 做通气培养可用6—8层纱布代替棉塞。 7灭菌 固体试管培养基斜面长度不超过试管一半。 8无菌检查 将培养基放入培养箱做培养做无菌检查。固体试管应烘干试管内壁的水分。 培养基灭菌方法 液体及琼脂固体培养基。一般121℃灭菌20分钟，若容器大，粘度大，培养基多应延长时间。 明胶培养基 112℃灭菌25分钟，最高温度不应超过112℃，否则明胶凝固能力消失。 马铃薯培养基 因含有抵抗能力很强的马铃薯杆菌，121℃灭菌30分钟。 培养基灭菌时会发生各种变化，只有极少数培养基对热完全稳定。 大多数糖类灭菌都发生改变，可能形成对微生物有毒害的物质，含糖高的培养基灭菌后颜色变深。 培养基蛋白质含量越高，杀菌速度越慢。麦芽汁、米曲汁灭菌后大分子物质凝集会发生沉淀。 甲醛对细菌和酵母杀菌效果好，硫磺对霉菌效果好。 甲醛熏蒸，按甲醛用量的一半称取高锰酸钾于瓷碗或玻璃容器内，再量取甲醛，倒入容器，立即关门，几秒种后甲醛即可挥发。熏蒸至少在使用前24小时进行，熏蒸后密闭保持12小时。熏蒸完毕量取为甲醛一半的氨水迅速放在室内，可以很快减弱甲醛的气味。 硫磺熏蒸 在地面上洒水，曲室密闭，室内保持一定湿度，将硫磺用火燃烧