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表面等离子体共振仪原理及其应用 STAR STAR 内容摘要 1.表面等离子体共振技术简介 2.表面等离子体共振技术原理介绍 3.表面等离子体检测分析的类型 4.表面等离子体共振特点及应用 5.实验部分 6.总结与展望 SPR技术简介 表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance technology，SPR)是20世纪90年代发展起来的，应用SPR原理检测生物传感芯片上配位体与分析物作用的一种新技术。 SPR发展简史 1902年，Wood在光学实验中发现SPR现象 1941年，Fano解释了SPR现象 1971年，Kretschmann为SPR传感器结构奠定了基础 1983年，Liedberg将SPR用于IgG与其抗原的反应测定 1987年，Knoll等人开始SPR成像研究 1990年，Biacore AB公司开发出首台商品化SPR仪器 SPR原理介绍 1.消逝波 2.金属表面等离子波 3.SPR的光学原理 消逝波 界面 密 疏 全反射的光波会透过光疏介质约为光波波长的一个深度，再沿界面流动约半个波长再返回光密介质。光的总能量没有发生改变。透入光疏介质的光波成为消逝波。 金属表面等离子波 把金属的价电子看成是均匀正电荷背景下运动的电子气体，这实际上是一种等离子体。由于其电子系统集体振荡形成了等离子波。 SPR光学原理 我们在前面提到光在棱镜与金属膜表面上发生全反射现象时，会形成消逝波进入到光疏介质中，而在介质（假设为金属介质）中又存在一定的等离子波。当两波相遇时可能会发生共振。 SPR光学原理 当消逝波与表面等离子波发生共振时，检测到的反射光强会大幅度地减弱。能量从光子转移到表面等离子，入射光的大部分能量被表面等离子波吸收，使得反射光的能量急剧减少。 从图中反射光强的响应曲线看到一个最小的尖峰，此时对应的入射光波长为共振波长，对应的入射角为SPR角。SPR角随金表面折射率变化而变化，而折射率的变化又与金表面结合的分子质量成正比。这就是SPR对物质结合检测的基本原理。 SPR光学原理 SPR仪检测原理 SPR检测分析的类型 1.直接检测 2.夹心反应 3.替代反应 4.抑制竞争反应 直接检测 操作简单 相对分子质量10kDA 图1. 直接检测原理示意图 夹心反应 图2. 夹心反应原理示意图 相对分子质量 5000 Da 更高的灵敏性及选择性 替代反应 可用于检测小分子 可用于荧光分析 此类型稀少 图3. 替代反应原理示意图 抑制竞争反应 图4. 抑制竞争反应原理示意图 对于小分子待测物具有较高灵敏度 应用范围广 可再生 SPR特点 1.可进行实施监测 2.无需样品标记 3.样品用量少 4.灵敏度高，应用范围广 5.不需对样品进行前处理 6.能测量浑浊甚至不透明样品 SPR技术的应用 Surface plasmon resonance biosensor for dopamine using D3 dopamine receptor as a biorecognition molecule Abstract We report here, a new kind of bioaffinity sensor for DA based on surface plasmon resonance (SPR) using a D3 dopamine receptor (DA-RC) as a recognition element. A conjugate of DA was synthesized using bovine serum albumin (BSA) protein. The biosensor was highly specific for DA and showed no significant interference from potent interferences such as ascorbic acid (AA), uric acid (UA) and other DA analogues. Since this biosensor is simple, effective and is based on utilization of natural receptor, our study presents an encouraging scope for development of portable detection systems for in-vitro and in-vivo measurement of DA in clinical and medical diagnostics. Biosensors a