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体外诊断试剂的分类和基本原理 中国药品生物制品检定所 祁自柏 TEL：01067095386 E.Mail:QIZIBAI@263.NET 我国体外试剂的几个发展阶段1 七十年代末， 乳胶凝集，血球凝(PHA,RPHA）2 八十年代初期，放射免疫测定(RIA)， 抗HBs单克隆抗体3 八十年代中期，酶联免疫试剂，基因工程表达乙肝 病毒核心抗原和e抗原4 九十年代， 聚合酶链反应(PCR)，丙肝，戊肝 病毒基因被克隆，各种基因工程抗 原被应用5 近期， 发光免疫,生物芯片技术(基因芯片， 蛋白芯片) （第一类）酶联免疫（酶标板、磁珠、微粒子）类试剂 酶联免疫法：乙型肝炎病毒e抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）； 癌胚抗原定量测定试剂盒(免疫荧光法) 化学发光法：人生长激素（GH）定量测定试剂盒 增强化学发光免疫分析法：巨细胞病毒抗体检测试剂盒 时间分辨荧光法：游离甲状腺素（FT4）定量测定试剂盒 电化学发光法：甲型肝炎病毒抗体诊断试剂盒 微粒子酶免法：丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒 酶联免疫试剂 抗原抗体之间的特异反应与酶的高效催化反应有机的结合。 固相 样品 放大 抗原 抗体 抗抗体-酶-底物-显色 抗体 抗原 抗体-酶-底物-显色 丙肝抗原 ELISA试剂 HIV-1 p24抗原检测试剂的原理 几种主要的酶联免疫方法模式 1 双抗体夹心法应用 HBsAg, HBeAg, HBcAg, pres1, pres22 双抗原夹心法 应用 抗HBs，抗HIV 3竞争法 应用 抗HBc, 抗pres2 4 中和抑制法 应用 抗Hbe 5 捕获法 应用 抗HBc IgM 6 间接法应用 抗HCV, 抗HEV, （第二类）胶体金（硒、乳胶）类试剂 胶体金法：梅毒抗体-乙肝表面抗原诊断试剂盒 胶体硒法：HIV(1+2+0)试剂盒 胶体金试剂原理 硝酸纤维膜 加样 检测区 对照区 (HBsAg) ----------------------------- 玻璃纤维膜 ------------------- 抗HBs 羊抗鼠 鼠抗HBs 胶体金免疫层析法反应示意图 HIV胶体金类快速诊断试剂检测结果 第三类）免疫印迹试剂 免疫印迹试剂盒: 风湿病自身抗体检测试剂盒（免疫印迹法） 免 疫 印 迹 法 示 意 图 （第四类）蛋白芯片（微阵列）类试剂 蛋白芯片（微阵列）：丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（蛋白芯片法）； 多肿瘤标志物检测试剂盒（蛋白芯片法） （第五类）单抗类试剂 血型定型类试剂：血型定型试剂盒（单克隆抗体） 免疫组化：ImmuChem免疫组化试剂盒（单抗） 免疫比浊：血清载脂蛋白A1免疫比浊试剂盒 乳胶凝集：D-dimer二聚体乳胶凝集试剂盒 （第六类）多抗类试剂 血型定型类试剂：血型定型试剂盒（人血清/马血清） 免疫组化：癌胚抗原检测试剂盒（多抗） 免疫比浊：β-微球蛋白测定试剂盒（免疫比浊法） 乳胶凝集：沙门氏菌乳胶凝集试剂盒 抗原 抗原：指进入有免疫活性的组织（宿主）而引发免疫应答的物质。或虽不能引发免疫，但可以同抗体结合的物质。 蛋白质，多糖，核酸，糖脂，青霉素 全抗原性具有多个抗原决定族 抗体 宿主对体内存在的外来分子，微生物或其他因子的应答而产生的蛋白质（免疫球蛋白，丙种球蛋白） 根据抗体性质：多克隆抗体，单克隆抗体 根据抗体分子结构：IgA, D, E, G, M 单克隆抗体 由一株淋巴细胞产生，针对一种抗原决定族 抗原免疫小鼠-取脾脏-与瘤细胞融合-克隆筛选-单克隆抗体细胞株 扩增细胞-注射入小鼠腹腔-采腹水-纯化抗体 多克隆抗体 针对多个抗原决定族 抗原免疫动物-采集动物血清 纯化抗体 （第七类）诊断血清（菌液