用血红蛋白的提取与分离cr特2011-12-21.pptVIP

(一)蛋白质分离和提取的原理 一.基础知识 根据蛋白质各种特性的差异： 分子的形状、大小 电荷性质和多少 溶解度 吸附性质 对其他分子亲和力 高温灭菌和酒精灭菌分别利用蛋白质的何种作用，作用结果是什么被破坏？ 变性、变性、空间结构 人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？ 鸡的红细胞具有细胞核，含有DNA，便于进行DNA的提取，人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白 （二）蛋白质提取和分离的方法 凝胶色谱法：又称分配色谱法 电泳法 1.凝胶色谱法 2）材料：凝胶 (分配色谱法) 1）概念 根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法 凝胶是微小的多孔性球体，如葡聚糖或琼脂糖。内部有许多贯穿的通道。 3.凝胶色谱法的原理—分子筛效应 大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快； 小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部，路程长，流动慢。 凝胶色谱柱 洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。 2.电泳 1)概念 带电粒子在电场作用下发生迁移的过程 2)原理 利用了待分离样品中各分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 3)类型: 琼脂糖凝胶电泳 聚