实验5小麦萌发前后收淀粉酶活力的比较.pptVIP

实验5 小麦萌发前后淀粉酶 活力的比较 一、实验目的 学习分光光度计的原理和使用方法 学习测定淀粉酶活力的方法 了解小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 二、实验原理 淀粉是植物最主要的贮藏多糖，也是人和动物的重要食物和发酵工业的基本原料。 淀粉经淀粉酶作用后生成麦芽糖、葡萄糖等小分子物质而被机体利用。 淀粉酶主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶两种。α-淀粉酶可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。β-淀粉酶可从淀粉的非还原性末端进行水解，每次水解下一分子麦芽糖，又被称为糖化酶（啤酒发酵前期工艺）。 淀粉在体外或体内(细胞外)的降解: 水解的键 作用方式 产物 α-淀粉酶 α-1,4糖苷键 任何位置 麦芽糖和葡萄 糖及小分子量多糖 β-淀粉酶 α-1,4糖苷键 非还原性单位 麦芽糖连续单位 极限糊精 α-1,6糖苷键酶 水解支链淀粉中 支链淀粉的 糊精和麦芽糖的 (如植物中的R酶和 α-1,6糖苷键 分支部位 混合物 小肠粘膜的α-糊精 酶等) (只能从淀粉的非 还原端开始水解) 2（C6H10O5）n+nH2O——nC12H12O11 淀粉酶催化产生的这些还原糖能使3,5-二硝基水杨酸还原，生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸，后者可用分光光度计法测定。 二、实验原理 3,5-二硝基水杨酸 3-氨基-5-硝基水杨酸 休眠种子的淀粉酶活力很弱，种子吸胀萌动后，酶活力逐渐增强，并随着发芽天数的增长而增加。 本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。 三、主要仪器设备 离心机、离心管、研钵、电炉、恒温水浴、20mL具有塞子的刻度试管、试管架、移液管、分光光度计。 分光光度计 根据Lambert-beer定律： 标准管：A=KCsL (下标S：标准液) 待测管：Ax＝KCxL (下标X：待测液) 四、实验步骤 酶液的提取 酶活力的测定 计算 五、注意事项 1、发芽后的酶液要稀释适量； 2、4个管在25℃反应时间一定要保持一致。