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单克隆抗体研发全景概况 抗体是一种由效应B细胞分泌的免疫球蛋白，协助免疫系统鉴别、中和抗原或其他外来物质。抗体由对称的2条重链及2条轻链组成，其中重链类型决定抗体亚型，抗原结合域是重链的轻链可变区组合形成的抗原结合位点。1975年，Kohler和Milstein首先建立了杂交瘤技术。该技术通过体外持续培养骨髓瘤细胞，融合可分泌抗体的B淋巴细胞，再次经黄嘌呤氨基蝶呤胸苷筛选及克隆化得到大量单克隆细胞株。这一技术为治疗性单克隆抗体的发展奠定了基础。单克隆抗体根据其来源可以分为鼠源化单克隆抗体（-omab，莫单抗）、人鼠嵌合体单克隆抗体（-ximab，昔单抗）、人源化单克隆抗体（-zumab，珠单抗）和全人源化单克隆抗体（-umab）。截止发稿之时，FDA已经批准50余种单克隆抗体类药物，其中多个药物实现了超级重磅炸弹级别的销售额。 效应B细胞：浆细胞 抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链（H链）；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链（L链）。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种，重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中，不同抗体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨基酸序列。可变区位于Y的两臂末端。在可变区内有一小部分氨基酸残基变化特别强烈，这些氨基酸的残基组成和排列顺序更易发生变异区域称高变区。高变区位于分子表面，最多由17个氨基酸残基构成，少则只有2 ～ 3个。高变区氨基酸序列决定了该抗体结合抗原抗原的特异性。一个抗体分子上的两个 HYPERLINK /doc/4138933-4338581.html \t _blank 抗原结合部位是相同的，位于两臂末端称抗原结合片段（antigen-binding fragment, Fab）。Y的柄部称结晶片段（crystalline fragment,FC），糖结合在FC 上。 单克隆抗体的发展经历了四个阶段，分别为：鼠源性单克隆抗体、嵌合性单克隆抗体、人源化单克隆抗体和全人源单克隆抗体。 鼠源性单克隆抗体（-omab，莫单抗）：鼠杂交瘤单克隆抗体主要是将来源于免疫接种过的小鼠的B 细胞与骨髓瘤细胞融合，继而筛选出既能无限增殖又能分泌抗体的鼠杂交融合细胞，进而进行筛选、抗体制备和抗体纯化。 嵌合性单克隆抗体（-ximab，昔单抗）：指用人的恒定区取代小鼠的恒定区，保留鼠单抗的可变区序列，形成一个人-鼠杂合的抗体。其研制程序快，可大幅度降低异源抗体的免疫原性，却几乎保持亲本鼠单抗全部的特异性和亲和力。另外，它还具有人抗体的效应功能，如补体固定、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ADCC，antibody dependent cell-mediated cytotoxicity）等。 人源化单克隆抗体（-zumab，珠单抗）：利用现有的无数已详细分析过的小鼠抗体，取其与抗原直接接触的那段抗体片段（互补决定区，CDR）与人的抗体框架嫁接，经亲和力重塑，可维持其特异性和大部分的亲和力，同时几乎去除免疫原性和毒副作用。 全人源单克隆抗体（-umab）：其抗体的可变区和恒定区都是人源的，去除免疫原性和毒副作用。全人源抗体制备的相关技术主要有：人杂交瘤技术、EBV 转化 B 淋巴细胞技术、噬菌体显示技术（phage display）、转基因小鼠抗体制备技术（transgenic mouse）和单个B细胞抗体制备技术等。 由人源化和全人源抗体制备的人源化和全人源抗体药物因其具有高亲和力、高特异性、毒副作用小的特点，克服了动物源抗体及嵌合抗体的各种缺点，已经成为了治疗性抗体药物发展的必然趋势。 本文在2017年发表的《单克隆抗体药物研究进展》一文（作者赵晨曦等）的基础上，补充了各种单抗药物的国内申报情况与国内外市场情况。 1靶向肿瘤相关分子单克隆抗体进展 迄今为止，治愈肿瘤仍然是临床治疗面临的挑战。当手术、放疗和化疗无法控制肿瘤的发展进程，抗体成为肿瘤治疗的重要辅助手段。与传统药物相比，治疗性抗体不仅可以反复给药，同时具有高靶向性、低毒副作用和疗效好等特征。下文根据单克隆抗体作用特点，通过抑制肿瘤生存的关键分子、激活针对肿瘤的免疫固有性和适应性及抗体偶联细胞毒药物3个方面介绍单克隆抗体在肿瘤治疗领域的应用。 1.1?抑制肿瘤生存的关键分子 1.1.1 CD20 概述 B淋巴细胞表面标志物CD20初始表达于Pro-B细胞(CD45R+，CD117+)，随着B细胞的成熟表达不断增加。CD20在分化成熟的浆细胞、正常造血干细胞及其他类型造血细胞系均无表达。因此，CD20成为治疗B淋巴细胞白血病的分子药靶。 代表药物 （1）Rituximab，中文名利妥昔单抗，商品名Rituxan，美罗华。