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酶的竞争性抑制实验报告 　　酶的竞争性抑制实验报告 　　实验十六、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 　　实验十六:丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 　　【实验名称】:丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 　　09救援一班 第三大组 李岚宇 2009222336 　　室温:25? 　　(一)实验目的:1、学习和掌握竞争性抑制作用的特点。 　　2、观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。 　　(二)实验原理:化学结构与酶作用的底物结构相似的物质，可与底物竞争结合酶的活性中心，使酶的活性降低甚至丧失，这种抑制作用称为竞争性抑制作用。琥珀酸脱氢酶是机体内参与三羧酸循环的一种重要的脱氢酶，其辅基为FAD，如心肌中的琥珀酸脱氢酶在缺氧的情况下，可使琥珀酸脱氢生成延胡索酸，脱下之氢可将蓝色的甲烯蓝还原成无色的甲烯白。这样，便可以显示琥珀酸脱氢酶的作用。 　　丙二酸的化学结构与琥珀酸相似，它能与琥珀酸竞争而和琥珀酸脱氢酶结合。若琥珀酸脱氢酶已与丙二酸结合，则不能再催化琥珀酸脱氢，这种现象称为竞争性抑制。如相对地增加琥珀酸的浓度，则可减轻丙二酸的抑制作用。 (三)实验材料与仪器: 　　1器材 大白鼠、手术剪、镊子、磁盘、匀浆器、量筒、烧杯、纱布、滤纸、试管及试管架、恒温水箱、电热水浴锅 　　2试剂 0.2mol/L琥珀酸溶液、0.02mol/L琥珀酸溶液、0.2mol/L 　　丙二酸溶液、0.02mol/L丙二酸溶液、1/15mol/L磷酸缓冲液、0.02,甲烯蓝、液体石蜡。 　　(四)实验步骤: 　　1、酶提取液的制备:去大白鼠的肝脏、心脏、肾脏，用冷水洗3次，加入1/15mol/L磷酸缓冲液pH 在7.4。在匀浆器中进行匀浆，然后用纱布过滤，用干净的烧杯收集过滤的备用。 2、取试管6支，编号，在按图步骤操作， 　　各管溶液立即混均匀，沿试管壁加入液体石蜡，约0.5cm，各管置于37?的水浴中保温，切勿摇动试管，随时观察比较各试管颜色的变化，记录褪色时间。 　　(五)实验结果记录: 　　表1 (六)实验讨论: 　　1、酶提取液中有琥珀酸脱氢酶活性，表1所示，在试管1中没有抑制剂，但琥珀酸依然能脱氢，使得甲烯蓝反应得甲烯白。 　　2、各管的褪色有明显的时间差别，褪色时间随[I]/[S]逐渐增大，而增大(转 载 于:wWW.xIElw.COM 写论文网:酶的竞争性抑制实验报告)。 　　3、丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型是竞争性抑制，其特点:最大反应速率Vmax不变，米氏常数Km增大，竞争性抑制可以通过增大底物浓度来减轻抑制程度。 4、本实验中5号、6号试管的作用是做对照，5号试管和1号试管做对照，说明酶提取液中有琥珀酸脱氢酶的存在，6号试管中的酶提取液在100?的水 　　浴加热煮沸过，所以琥珀酸脱氢酶是失活的。 　　【注意事项】 : 　　1、酶提取液的制备应操作迅速，以防止酶活性降低。 　　2、加入液体石蜡的作用是隔绝空气，以避免空气中的氧气对实验造成影响，因此加石蜡时试管壁要倾斜，注意不要产生气泡。3、37?水浴保温过程中，不能摇动试管，避免空气中的氧气接触反应溶液，使得还原型的甲烯白重新氧化成蓝色。 　　4.、37?水浴保温过程中，要注意随时观察各试管的褪色情况。 5、实验结果结束后，一定要洗干净试管内的液体石蜡。2010年10月9号 　　篇二:实验四 酶的特性实验 　　说明:本实验由四个小实验组成，其中第一个实验(酶的专一性)必 　　做，其他三个小实验选做(至少做一个) 　　写实验报告时，可以只写需要做的实验内容～ 　　实验四 酶的特性实验 　　一、实验目的 　　酶是生物催化剂，生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。 二、实验内容 　　本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4个小实验组成。 (一)酶的专一性 1、实验原理 　　本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜，能氧化具还原性的糖，生成砖红色沉淀氧化亚铜。 　　2、材料、仪器与试剂 　　(1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液 (2)仪器:恒温水浴;沸水浴;试管及试管架; 　　(3)试剂:2%蔗糖溶液;溶于0.3% NaCl的0.5%淀粉溶液;班氏试剂。 3、实验操作 (1)稀释唾液的制备 ?唾液的获取 　　用一次性杯取一定量的饮用