色谱分离化第四章.pptVIP

按出峰顺序各组分依次为：仲丁巴比妥， 异戊巴比妥，戊巴比妥，度冷丁，速巴比妥， 导眠能和苯巴比妥。它们大多很容易被鉴别。 但2号峰和3号峰的质谱图和光谱图十分相似。 （4）多维色谱联用技术 目前已出现的多维色谱联用有GC/GC/MS， GC/GC/MS/MS，LC/GC/MS，LC/GC/FTIR等 例：GC/GC/MS分析苯乙烯中含量在百万 分之几的杂质。 主要试验条件：某一级色谱柱为3m，内径 2mm的3％silar 10c pyrex填充柱，第2级色谱 为柱长为30mm的DB-170熔融石英毛的管径。 左图为第一维色谱获得的色谱图，其中进入冷阱并被 导入第二维色谱柱的流出物用A表示，B为苯乙烯的峰。 右图为第二维色谱获得的色谱图，经质谱分析表明，图 中1-3号峰为二甲苯的异构体，4-6号峰为含3个碳的烷基 苯的异构体。 4.2 色谱定量分析 定量依据： 定量计算 ①准确测定峰的面积或峰高 ②求出定量校正因子 ③选择定量的方法 4.2.1 峰面积的测量 （1） 峰高乘半峰宽 峰形对称，且不太窄时适应 这样计算的峰面积是实际峰面积的0.94倍， 实际的峰面积应为： 作相对计算时，1.065可以省略。 （2）峰高乘平均峰宽 不对称峰采用此法计算较为准确 （3）峰高代替峰面积定量 对于一定的样品，操作条件严格不变 时，在一定的进样范围内，半峰宽不变。 当峰形较窄时，用此法定量更准确。 （4）峰高乘保留时间 在一定操作条件下，同系物的半峰宽与 保留时间成正比，对于狭窄峰或半峰宽以上 重叠的峰可用此法计算。 作相对计算时，1.065和b可以略去。这种 方法对含量相对较大的组分有一定的误差。 （5）数字积分仪和色谱数据工作站 4.2.2 定量校正因子 同一检测器对不同类型物质的响应值不同 m1 m2时，A1 A2 所以，不能用A直接计算含量，必须乘上一个校正因子，使组分的面积值转化为相应的物质量. 例：乙酸乙酯：乙酸丁酯：乙酸戊酯 ＝5mL:5mL:5mL ＝0.901：0.882：0.871 4.2.3 定量分析方法 （1）归一化法 样品中所有组分都能流出色谱柱，且 检测器都能检出响应信号时，可用此法 进行定量计算. 设样品中有几个组分，则组分I的百分含量为： 采用峰高定量时应注意： ①操作条件严重影响峰高； ②柱吸附，柱超载会使色谱峰变形； ③进样速度直接影响峰高和峰宽。 （2）内标法 　　当试样中的组分不能全部出峰，或不需定量的色谱峰未能定性或重叠时，可用此法。 例：醇类混合物中乙醇含量的测定（丙酮作 　　内标物） 设试样质量为 m (g) ，内标物为 ms (g) ， 待测物：mi＝fi’Ai　内标物：ms＝fs’As %Ci＝　 ×100＝　　　　 ×100 mi m ms fi’Ai fs’As m ＝ fi’Ai fs’As ms m · ×100 内标法一般以内标物为基准，即fs’＝1.00 若m、ms固定，则式子可化简为： %Ci＝ ×常数 Ai As 以Ci%对Ai/As作图， 可得内标标准曲线。 （3）外标法（标准曲线法） 　　若试样中被测组分浓度变化不大时，可 采用单点校正法。 Ci%＝ ×Cs% Ai As 用一系列不同浓度C标准溶液进样测量峰面积A,以A对C作图绘出标准曲线 4-2-4　影响定量分析准确性的因素 （1）样品的稳定性和代表性； （2）样品的导入,样品量取误差为2-5%； （3）柱系统的影响：分离状况、热分解和吸附等； （4）操作条件的影响：柱温、载气流速、检测器等。 第四章 色谱的定性和定量分析 4.1 色谱定性分析 4.1.1 利用已知物对照定性 依据：各种物质在一定的实验条件下均有 确定的保留值 前提条件：对样品的组成比较清楚 (1) 利用保留时间或保留体积定性 将已知纯物质和未知物在相同的色谱条件进样分析 被测组分tR＝5min 某纯物质tR＝5min 可能是同一物质 优点：操作简单快速 缺点：柱温、流动相流速、进样量等操作条件 对保留值的影响较大 （2）加入已知纯物质增加峰高定性 （3）双色谱系统定性 改变色谱条件以改变分离选择性，使不同的物质显示不同保留值. 观察未知物和标准物的保留是否改变以验证是否为同一物质. GC:双柱定性，或降低柱温提高定性的准确性 LC：改变流动相或固定相，或者两者同时改变 4.1.2 利用文献保留数据定性 (1) 相对保留