实验五杰蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定.pptVIP

实验五 蛋黄中卵磷脂的提 取及鉴定 【实验目的】 1．掌握从动物中提取有效成分的一般原 理和方法。 2．熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。 3．了解卵磷脂水解后的产物，巩固对卵 磷脂组成结构的认识。 【实验原理】 【实验步骤】 1．卵磷脂的提取 （1）取1个熟的鸡蛋黄，置于研钵中研细，加 入15mL 95％乙醇溶液，研磨，搅拌均匀。减压过滤，收集滤液。将漏斗的残渣移入研钵内，加15mL 95％乙醇溶液，研磨，过滤(滤液应完全透明)，将两次滤液合并于蒸发皿内。 （2）将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇，至 干，得到黄色油状物。 （3）冷却后，加入2mL～3mL氯仿，搅拌使 油状物溶解。 （4）在搅拌下慢慢加入10mL～15mL丙酮， 即有卵磷脂析出，搅动使其成团粘附于 玻棒上，溶液倒入回收瓶内。 2．卵磺脂的水解及其组成鉴定 （1）卵磺脂的水解 取一支干净试管，加入提取的卵磷脂和5mL10％氢氧化钠溶液，放入沸水浴中加热10min，并用玻棒搅拌，使卵磷脂水解。冷却后，在玻璃漏斗中用棉花过滤，得滤液（供以下检查用）。 （2）脂肪酸的检查 取棉花上沉淀少许，加5mL水，搅拌，有无泡沫生成？过滤，得滤液，以浓硝酸酸化后加入数滴10％醋酸铅溶液，观察有何现象? （3）甘油的检查 取小试管一支，加入1滴5％硫酸铜溶液，2滴10％氢氧化钠溶液，振摇，有氢氧化铜沉淀生成。加入水解液，沉淀溶解后，得深蓝色甘油铜溶液。 （4）胆碱的检查 取1mL滤液，滴加浓硫酸中和(以蓝色石蕊试纸检查)，加克劳特试剂1滴，有砖红色沉淀生成。 （5）磷酸的检查 取一支干净试管，加入10滴滤液和5滴95%乙醇溶液，用硝酸酸化，加1mL钼酸铵试剂，观察有何现象产生？最后直接用火加热5min～10min，观察有无黄色磷钼酸铵沉淀生成？ 注意事项 乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好 思考题 加丙酮之前为何要加少量的氯仿？ * *