realtimepcr原理和应用报告中国科学院上海细胞生物学研究所.pptxVIP

;提纲：??;实时荧光定量PCR定义：;与普通PCR的区别; 牛牛文库文档分享; 牛牛文库文档分享; 牛牛文库文档分享;荧光阈值是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值，它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上，一般荧光域值的设置是 基线（背景）荧光信号的标准偏差的 10 倍。 每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数被称为 CT 值（ threshold value ）。 ;;定量PCR的数学原理;;斜率与扩增效率;;荧光定量PCR化学原理;1、SYBR Green 法;SYBR Green 熔解曲线分析;SYBR Green法优缺点;2、TaqMan探针法;TaqMan作用机理;TaqMan法优缺点; Real-time PCR 方法应用 ; ?绝对定量(Absolute Quantification，AQ) 病原体检测 转基因食品检测 基因表达研究 ?相对定量(Relative Quantification，RQ) 基因在不同组织中的表达差异 药物疗效考核 耐药性研究 ;绝对定量与相对定量的定义;绝对定量通过标准品定量;绝对定量：从荧光到拷贝数;相对定量通过内标定量;相对定量：参照因子Calibrator ;相对定量分析方法1 -ΔΔCt;相对定量分